維藥高孜萬提取物對(duì)心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用
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【摘要】:目的:研究高孜萬提取物對(duì)心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用,為闡述該藥材抗心肌缺血活性的物質(zhì)基礎(chǔ)及其進(jìn)一步的開發(fā)利用提供試驗(yàn)依據(jù)。方法:1)建立缺氧/復(fù)氧體外小鼠原代心肌細(xì)胞模型以模擬缺血再灌注損傷。實(shí)驗(yàn)分為二十四組,正常對(duì)照組,缺氧/復(fù)氧組,陽(yáng)性對(duì)照組(缺氧/復(fù)氧+1.25mg/mL葛根素),高、中、低劑量乙醇提取物處理組(缺氧/復(fù)氧+高、中、低濃度高孜萬乙醇提取物),高、中、低劑量石油醚萃取物處理組(缺氧/復(fù)氧+高、中、低濃度高孜萬石油醚萃取物),高、中、低劑量乙酸乙酯萃取物處理組(缺氧/復(fù)氧+高、中、低濃度高孜萬乙酸乙酯萃取物),高、中、低劑量正丁醇萃取物處理組(缺氧/復(fù)氧+高、中、低濃度高孜萬正丁醇萃取物),高、中、低劑量水萃取物處理組(缺氧/復(fù)氧+高、中、低濃度高孜萬水萃取物),高、中、低劑量總黃酮有效部位處理組(缺氧/復(fù)氧+高、中、低濃度高孜萬總黃酮有效部位),高、中、低劑量蘆丁處理組(缺氧/復(fù)氧+高、中、低濃度高孜萬蘆丁)。采用MTT法檢測(cè)原代心肌細(xì)胞存活率,采用酶標(biāo)法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中乳酸脫氫酶(LDH)水平、細(xì)胞內(nèi)的丙二醛(MDA)含量和細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)的活力。2)建立C57BL/6小鼠缺血再灌注模型,取C57BL/6小鼠分為假手術(shù)組、心肌缺血再灌注組、高孜萬總黃酮有效部位高中低劑量組,采用抗原-抗體Elisa法測(cè)定血清心肌酶CK-MB、心標(biāo)志物CTn-I活性,采用伊文思藍(lán)-氯化三苯四氮唑染色法測(cè)定心肌梗死率,并對(duì)缺血梗死區(qū)進(jìn)行病理HE染色。結(jié)果:1)與正常對(duì)照組比較,缺氧/復(fù)氧組呈現(xiàn)時(shí)間依賴性地降低原代心肌細(xì)胞存活率;與缺氧/復(fù)氧組比較,乙醇提取物處理組、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水萃取物、總黃酮有效部位、陽(yáng)性對(duì)照及蘆丁組顯著提高細(xì)胞存活率(P0.01或P0.05),降低LDH、MDA含量(P0.01或P0.05),SOD活力顯著性提高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。綜合作用時(shí)間和作用濃度,乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物作用較強(qiáng)(P0.01)。2)各組心肌梗死百分率比較:與假手術(shù)組比較,模型組心肌梗死百分率顯著提高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);與模型組比較,高孜萬總黃酮有效部位組心肌梗死百分率顯著下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。各組中CK-MB和CTnⅠ水平比較:與假手術(shù)組比較,模型組CK-MB和CTnⅠ水平顯著性增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。與模型組比較,高孜萬總黃酮有效部位組CK-MB和CTnⅠ水平顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論:1)高孜萬乙醇提取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水萃取物、總黃酮有效部位、蘆丁對(duì)乳鼠細(xì)胞缺氧/復(fù)氧造成的損傷具有保護(hù)作用,其機(jī)制可能為通過干預(yù)平衡氧化應(yīng)激產(chǎn)物的生成和抗氧化應(yīng)激的酶系統(tǒng)來減少缺氧/復(fù)氧所致原代心肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷。2)高孜萬總黃酮有效部位對(duì)小鼠心肌缺血再灌注損傷有保護(hù)作用,可以降低心肌梗死率,減少心肌酶水平。
【學(xué)位授予單位】:新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R29
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,本文編號(hào):1297163
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