許多人類遺傳性疾病都與LIM-同源異形框（LIM homeobox,LHX）基因有關。目前關于Lhx9和Lhx4在脊椎動物胚胎發(fā)育過程中的功能研究尚不完整,主要源于對其在胚胎發(fā)育中的時空表達模式不夠清楚。此外,研究發(fā)現(xiàn)80%以上Lhx基因與視網(wǎng)膜的發(fā)育有關。然而,目前尚無研究報道Lhx9和Lhx4在斑馬魚視網(wǎng)膜中的表達模式和調控功能。本課題首先通過利用整胚原位雜交和切片原位雜交檢測lhx9和lhx4在斑馬魚胚胎及視網(wǎng)膜發(fā)育中的表達模式。結果發(fā)現(xiàn)在24hpf到5dpf的斑馬魚胚胎中,lhx9和lhx4的表達隨胚胎發(fā)育均呈動態(tài)變化。lhx9不但在大腦中表達,而且在視網(wǎng)膜內核層的內側,心臟和胸鰭的發(fā)育過程中有較長時期的表達;lhx4不但在斑馬魚胚胎的大腦和脊髓中表達,而且在聽囊發(fā)育的早期瞬時表達,在視網(wǎng)膜發(fā)育的后期lhx4持續(xù)在內核層的外側和外核層表達。本課題通過morpholino（MO）技術成功構建了敲減lhx9或lhx4的斑馬魚模型,結果發(fā)現(xiàn)MO敲減lhx9不影響斑馬魚視網(wǎng)膜內不同類型細胞的分化發(fā)育以及視網(wǎng)膜結構和功能的發(fā)育。MO敲減lhx4導致斑馬魚胚胎出現(xiàn)類似人類遺傳性垂體疾�。ㄈ�... 

【文章頁數(shù)】：122 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 斑馬魚的研究進展
    1.2 斑馬魚視網(wǎng)膜的研究進展
    1.3 LIM-HD轉錄因子在視網(wǎng)膜發(fā)育中的研究進展
    1.4 研究目的和意義
第二章 材料與方法
    2.1 實驗動物
    2.2 實驗儀器
    2.3 主要試劑及配制
    2.4 配魚和收集魚卵
    2.5 核酸提取和熒光定量PCR
    2.6 制備核酸探針
    2.7 整胚原位雜交
    2.8 切片原位雜交
    2.9 斑馬魚胚胎的顯微注射
    2.10 斑馬魚形態(tài)學觀察
    2.11 免疫熒光染色
    2.12 光刺激反應行為學
    2.13 統(tǒng)計分析
第三章 lhx9和lhx4 在斑馬魚胚胎發(fā)生中的表達模式
    3.1 lhx9 在斑馬魚胚胎發(fā)生中的表達模式
    3.2 lhx9 在斑馬魚視網(wǎng)膜發(fā)生中的表達模式
    3.3 lhx4 在斑馬魚胚胎發(fā)生中的表達模式
    3.4 lhx4 在斑馬魚視網(wǎng)膜發(fā)生中的表達模式
第四章 Lhx9 在斑馬魚視網(wǎng)膜發(fā)育中的功能研究
    4.1 MO敲減lhx9 斑馬魚模型的構建
    4.2 MO敲減lhx9 對斑馬魚胚胎形態(tài)發(fā)育的影響
    4.3 MO敲減lhx9 對斑馬魚視網(wǎng)膜發(fā)育的影響
    4.4 MO敲減lhx9 對斑馬魚視網(wǎng)膜細胞凋亡和增殖的影響
    4.5 MO敲減lhx9 對斑馬魚光刺激反應的影響
第五章 Lhx4 在斑馬魚視網(wǎng)膜發(fā)育中的功能研究
    5.1 MO敲減lhx4 斑馬魚模型的構建
    5.2 MO敲減lhx4 對斑馬魚胚胎形態(tài)發(fā)育的影響
    5.3 MO敲減lhx4 對斑馬魚視網(wǎng)膜發(fā)育的影響
    5.4 MO敲減lhx4 對斑馬魚視網(wǎng)膜細胞凋亡的影響
    5.5 MO敲減lhx4 對斑馬魚光刺激反應的影響
    5.6 vivo-MO敲減視網(wǎng)膜內lhx4 斑馬魚模型的構建
    5.7 vivo-MO敲減視網(wǎng)膜內lhx4 對胚胎形態(tài)發(fā)育的影響
    5.8 vivo-MO敲減視網(wǎng)膜內lhx4 對視網(wǎng)膜發(fā)育的影響
    5.9 vivo-MO敲減視網(wǎng)膜內lhx4 對視網(wǎng)膜內細胞凋亡的影響
    5.10 vivo-MO敲減視網(wǎng)膜內lhx4 對斑馬魚光刺激反應的影響
第六章 討論與結論
    6.1 討論與展望
    6.2 結論
第七章 本論文的創(chuàng)新點
參考文獻
附錄
作者簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
[1]以斑馬魚為疾病模型的小分子藥物篩選研究進展[J]. 趙呈天,賈碩,張曉麗.  中國海洋大學學報(自然科學版). 2019(09)
[2]斑馬魚:在生命科學中暢游[J]. 孫智慧,賈順姬,孟安明.  生命科學. 2006(05)



本文編號：3693886