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甜瓜屬異源多倍化引起葉色黃化的光適應性評價和microRNAs分析

發(fā)布時間:2018-11-18 17:54
【摘要】:異源多倍化是物種形成的重要過程,是植物進化的重要動力之一。異源多倍體通常具有許多優(yōu)于二倍體親本的性狀,如器官變大、抗脅迫能力增強等。Cucumis ×hytivus是通過黃瓜近緣野生種酸黃瓜和栽培黃瓜遠緣雜交以及基因組加倍獲得的甜瓜屬人工異源四倍體(以下簡稱新種)。新形成的異源多倍體由于受到“基因組沖擊”,其早期世代基因組發(fā)生了廣泛的遺傳及表觀遺傳變異,這些變異對異源多倍體的表型產(chǎn)生了顯著的影響。經(jīng)過多代自交獲得的表型穩(wěn)定的新種,其親緣關系明確,是研究異源多倍體物種形成和表型變異的理想模式系統(tǒng)。新種表現(xiàn)出葉綠素缺乏造成的不同于雙親的黃綠色葉片表型,并在其自交世代中穩(wěn)定遺傳。葉綠素是光合器官的基本組成部分,葉綠素缺乏對于新種的光合特性以及相關的生理特征有何影響不得而知。microRNAs (miRNAs)是近年來發(fā)現(xiàn)并被廣泛關注的一種小分子RNAs,對異源多倍體的表型變異發(fā)揮著重要的調(diào)控作用。因此,本研究圍繞新種的黃綠色葉片新表型,嘗試從光合生理和表觀遺傳學的角度揭示異源多倍化過程對新種產(chǎn)生的影響,主要研究結(jié)果如下:1.甜瓜屬異源多倍體的光合特性以及對弱光和長光照的生理響應研究新種的部分表型包括干重、生物量和Psat等光合參數(shù)均介于雙親之間。然而,新種的葉片呈現(xiàn)出黃綠色,葉綠素與類胡蘿1卜素含量均顯著低于雙親。新種葉片的葉綠素含量隨著葉片的成熟逐漸提高,其成熟葉的葉綠素含量與黃瓜相似。較低的光合色素含量并不顯著影響新種的光合及生長,Fv/Fm等葉綠素熒光參數(shù)顯示新種PSII功能完全正常。同時,采用弱光和長光照處理比較新種及其雙親對不同光逆境的適應性差異。酸黃瓜的總?cè)~綠素含量高、葉綠素a/b比值低、Psat和Rd較低,表明酸黃瓜的耐弱光特性,并在弱光處理下得以證實。長光照處理對新種的光合色素以及葉色并無影響,而酸黃瓜對長光照敏感,表現(xiàn)為Psat和Fv/Fm的顯著降低。新種中未發(fā)現(xiàn)優(yōu)于雙親的弱光和長光照適應性。2.甜瓜屬不同材料在葉片發(fā)育過程中對高光強的動態(tài)生理響應包括新種、二倍體親本酸黃瓜和黃瓜以及黃化突變體(以栽培黃瓜為材料誘導獲得的黃化突變體)在內(nèi)的四個不同葉色甜瓜屬材料均表現(xiàn)出一定的高光強適應性,未表現(xiàn)出明顯的光抑制現(xiàn)象,反映在一致的SLA降低和干物質(zhì)增加。四份材料對高光強的生理響應有所不同,表現(xiàn)為不同的葉綠素含量和凈光合速率的改變。新種在高光強下的適應性不及雙親,表明其可能不具備通常異源多倍體所表現(xiàn)的優(yōu)越性。然而,高光強下,具有耐蔭特性的酸黃瓜表現(xiàn)出一定的適應能力,這表明酸黃瓜是一種兼性耐蔭攀援植物。葉綠素對光合作用的影響存在遺傳差異,這可能與異源多倍化和誘變產(chǎn)生的一系列發(fā)育和調(diào)控系統(tǒng)的紊亂有關。此外,盡管新種和黃化突變體具有類似的缺綠葉片表型,但是新種在高光強處理下出現(xiàn)葉綠素含量的降低,這可能是一種避免過度吸收光能的防御反應,暗示新種的黃綠色幼葉可能受內(nèi)源調(diào)控機制的調(diào)控,以防止幼葉產(chǎn)生光傷害。3.甜瓜屬異源四倍體microRNAs的鑒定與分析通過高通量測序共鑒定獲得546條保守miRNAs和287條新miRNAs。二倍體雙親間有15條miRNAs差異表達。與酸黃瓜相比,新種中有7條miRNAs顯著上調(diào),6條miRNAs顯著下調(diào)。與黃瓜相比,新種中有6條顯著上調(diào),5條miRNAs顯著下調(diào)。在新種的幼葉和成熟葉中,共有27條保守miRNAs和12條新miRNAs差異表達,這表明miRNAs介導的調(diào)控機制在異源多倍體葉片的發(fā)育過程中發(fā)揮著重要作用。9條miRNAs的熒光定量驗證結(jié)果與測序結(jié)果基本一致。通過靶基因預測發(fā)現(xiàn),233條miRNAs靶向2483條靶基因序列。9個靶基因進行的熒光定量驗證結(jié)果顯示,部分靶基因與miRNAs的表達呈相反的趨勢。本研究還發(fā)現(xiàn),差異表達的保守miRNAs中有5條來自miR171家族,該家族已被報道與葉綠素生物合成的抑制有關。異源多倍化影響了新種葉綠素的生物合成,使新種呈現(xiàn)出黃綠色幼葉的表型,這暗示miR171可能參與調(diào)控異源多倍體葉綠素的生物合成。
[Abstract]:......
【學位授予單位】:南京農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:Q945;Q943.2

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本文編號:2340719

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