本文關鍵詞：擬南芥和水稻減數(shù)分裂同源重組事件的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《華東理工大學》 2013年

克雷伯氏肺炎桿菌中甘油代謝副產(chǎn)物敲除對1,3-丙二醇發(fā)酵的研究

周佳佳  

【摘要】：克雷伯氏肺炎桿菌(Kpneumoniae)是重要的工業(yè)微生物,可利用甘油為底物發(fā)酵產(chǎn)生1,3-丙二醇(1,3-PD)。在代謝途徑中,還原途徑產(chǎn)生1,3-PD,氧化途徑產(chǎn)生一系列副產(chǎn)物,如乳酸、乙酸、2,3-丁二醇(2,3-BD)等。在本文中,首先選擇敲除乳酸來探討其對1,3-PD發(fā)酵的影響,利用Red同源重組的方式分別敲除了兩個編碼D-乳酸脫氫酶的基因IdhA (99pbp)和dld-ldhA (1746bp),獲得突變株KG1-1和KG1-2。對KG1-1和KGl-2的發(fā)酵液進行分析,證實了KG1-1為D-乳酸不產(chǎn)的菌株,但其1,3-PD生產(chǎn)能力沒有明顯提高。為了獲得1,3-PD高產(chǎn)菌株,本文又嘗試敲除2,3-BD途徑,構建了KG1-3和KG1-4兩個菌株,代謝產(chǎn)物分析表明,KG1-3是2,3-BD不產(chǎn)的菌株,且敲除2,3-BD途徑后,導致1,3-PD濃度和菌濃分別降低60%和43%,而乳酸和丙酮酸則分別提高了225%和140%。為了進一步提高1,3-PD產(chǎn)量,在KG1-3的基礎上敲除1dhA,構建了KG1-5菌株,該菌株的1,3-PD產(chǎn)量和菌濃與原始菌比恢復了70%和90%。

【關鍵詞】：
【學位授予單位】：華東理工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：TQ923
【目錄】：

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