環(huán)烯烴共聚物（COC）化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,光學(xué)透明,耐極性有機(jī)溶劑和強(qiáng)酸、強(qiáng)堿,易加工,可批量生產(chǎn),是制作微流控芯片的理想材料。但其與其它常用的制作芯片的聚合物材料一樣,表面呈強(qiáng)疏水性,當(dāng)用于微流控芯片電泳（MCE）分析蛋白質(zhì)等生物大分子時(shí),樣品的物理吸附會(huì)導(dǎo)致樣品區(qū)帶展寬,表面電荷不均一,電滲流不穩(wěn)定,進(jìn)而影響分析效率,導(dǎo)致分析結(jié)果不重復(fù)。MCE分析時(shí)間短,耗樣量少,易集成化,是實(shí)現(xiàn)分析物快速分離檢測(cè)的理想技術(shù)。但是,用于MCE的分離通道相對(duì)較短,對(duì)于復(fù)雜生物樣品的分離分析依然存在挑戰(zhàn)。且樣品通道和分離通道相通,儲(chǔ)液池間的液位差引起的壓力流會(huì)引發(fā)進(jìn)樣量難以控制、樣品區(qū)帶展寬等問(wèn)題,影響定量準(zhǔn)確性和分離效率,對(duì)實(shí)驗(yàn)操作者專(zhuān)業(yè)技術(shù)要求高。而且芯片電泳不能實(shí)現(xiàn)對(duì)復(fù)雜生物樣品中蛋白質(zhì)的特異性分離,因此進(jìn)行MCE分析前樣品中蛋白質(zhì)的特異性預(yù)提取很有必要。此外,MCE聯(lián)用激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)（LIF）方法分析蛋白質(zhì)等自身無(wú)熒光或弱熒光的分析物時(shí),必須進(jìn)行熒光衍生,而大多衍生反應(yīng)的時(shí)間遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)MCE分離的時(shí)間,因而發(fā)展一種快速、高效的熒光標(biāo)記方法尤為必要。為了解決以上問(wèn)題,本論文在前人工作的基礎(chǔ)上,致力于探... 

【文章頁(yè)數(shù)】：146 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 芯片電泳分析系統(tǒng)
        1.2.1 電滲流理論
        1.2.2 進(jìn)樣技術(shù)
        1.2.3 分離模式
        1.2.4 檢測(cè)系統(tǒng)
        1.2.5 芯片電泳分析中常見(jiàn)問(wèn)題
        1.2.6 提高芯片電泳分析性能的方法
        1.2.7 聚合物在芯片電泳中的應(yīng)用
        1.2.8 芯片電泳在生化分析中的應(yīng)用
    1.3 本論文研究目的和主要內(nèi)容
    參考文獻(xiàn)
第二章 中性和陰離子聚合物多功能緩沖添加劑對(duì)麻黃堿和偽麻黃堿COC芯片電泳行為的影響
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 試劑與儀器
        2.2.2 溶液配制
        2.2.3 樣品衍生
        2.2.4 芯片制作
        2.2.5 芯片電泳
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 電泳運(yùn)行緩沖添加劑和模型分析物的選擇
        2.3.2 聚合物對(duì)芯片親水性的影響
        2.3.3 HPC對(duì)電泳行為的影響
        2.3.4 CMC對(duì)電泳行為的影響
        2.3.5 PSS對(duì)電泳行為的影響
        2.3.6 以CMC作緩沖添加劑時(shí)方法的評(píng)價(jià)
    2.4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第三章 水溶性聚合物與COC芯片的相互作用及其對(duì)蛋白質(zhì)電泳分析的影響
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 試劑
        3.2.2 設(shè)備和儀器
        3.2.3 芯片制作和芯片電泳
        3.2.4 溶液配制
        3.2.5 BSA和細(xì)胞色素c的胰蛋白酶消化產(chǎn)物制備
        3.2.6 樣品衍生
        3.2.7 芯片表面接觸角和通道表面性質(zhì)表征
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 聚合物與COC表面的相互作用
        3.3.2 蛋白質(zhì)的非特異性吸附
        3.3.3 聚合物對(duì)蛋白質(zhì)分離的影響
        3.3.4 蛋白質(zhì)的分離
    3.4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第四章 用于高效芯片電泳分析的電場(chǎng)驅(qū)動(dòng)固態(tài)水凝膠快速原位制備、去除和分析應(yīng)用
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 試劑和溶液制備
        4.2.2 儀器和設(shè)備
        4.2.3 樣品處理和衍生
        4.2.4 微通道中CS/β-GP水凝膠的制備和再生
        4.2.5 芯片電泳
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 微通道中CS/β-GP水凝膠的原位制備
        4.3.2 水凝膠對(duì)進(jìn)樣的影響
        4.3.3 電泳條件
        4.3.4 CS/β-GP水凝膠的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性
        4.3.5 CS/β-GP水凝膠的再生性
        4.3.6 水凝膠的蛋白質(zhì)分離效率
        4.3.7 應(yīng)用
    4.4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第五章 加熱條件下的蛋白質(zhì)快速衍生及其芯片電泳-LIF檢測(cè)適用性
    5.1 引言
    5.2 實(shí)驗(yàn)部分
        5.2.1 試劑和材料
        5.2.2 儀器和設(shè)備
        5.2.3 溶液配制
        5.2.4 熒光染料標(biāo)記蛋白
        5.2.5 SDS- PAGE
        5.2.6 芯片制作和芯片電泳
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 熒光染料的選擇
        5.3.2 FITC衍生反應(yīng)條件的優(yōu)化
        5.3.3 兩種條件衍生效率比較
        5.3.4 芯片電泳與SDS- PAGE比較
        5.3.5 EGFP純化過(guò)程監(jiān)測(cè)
    5.4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第六章 用于蛋白質(zhì)預(yù)提取的磁性核-殼MOFs材料合成及其在芯片電泳對(duì)組氨酸標(biāo)簽蛋白質(zhì)分析中的應(yīng)用
    6.1 引言
    6.2 實(shí)驗(yàn)部分
        6.2.1 試劑和溶液制備
        6.2.2 Fe_3O_4@PDA@Ni-MOF的合成及表征
        6.2.3 Fe_3O_4@PDA@Ni-MOF對(duì)蛋白質(zhì)的分離和重復(fù)利用
        6.2.4 芯片電泳
        6.2.5 SDS- PAGE
    6.3 結(jié)果與討論
        6.3.1 Fe_3O_4@PDA@Ni-MOF的合成和表征
        6.3.2 Fe_3O_4@PDA@Ni-MOF對(duì)蛋白質(zhì)的分離
        6.3.3 Fe_3O_4@PDA@Ni-MOF的重復(fù)利用性
        6.3.4 Fe_3O_4@PDA@Ni-MOF的應(yīng)用
    6.4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
結(jié)論與展望
在學(xué)期間的研究成果
經(jīng)費(fèi)來(lái)源聲明
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Highly Sensitive Chemiluminescence Detection for PDMS/GIass Micro-chip Electrophoresis[J]. Xiang Yi HUANG, Jiao Ning WANG, Lin CHEN, Ji Cun REN College of Chemistry and Chemical Engineering, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200240.  Chinese Chemical Letters. 2004(06)



本文編號(hào)：3687125