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富硒植物乳桿菌BC-25胞外多糖的研究

發(fā)布時間:2017-06-14 01:13

  本文關(guān)鍵詞:富硒植物乳桿菌BC-25胞外多糖的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:通過生物轉(zhuǎn)化得到不同形態(tài)的有機硒是提高硒利用率的很好途徑,但尋找安全的富硒載體和有機硒生物大分子的深入研究還需要投入更多努力。本文以15株疑似乳酸菌為材料,MRS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,篩選鑒定出了富硒能力最強的乳酸菌,并對比分析了富硒(試驗組)與未富硒(對照組)乳酸菌EPS的產(chǎn)量、理化性質(zhì)、單糖組成和結(jié)構(gòu),初步研究了富硒對乳酸菌EPS生成的影響。① 對乳酸菌生長曲線進行了測定,篩選并鑒定出了富硒優(yōu)勢乳酸菌。結(jié)果表明,適宜的加硒時間為培養(yǎng)后的第6 h,培養(yǎng)時間為24 h。通過對9株菌株比較,確定了較適宜的亞硒酸鈉添加濃度為6μg/mL,BC-25為富硒優(yōu)勢菌株,富硒量425.79 μg/g,硒轉(zhuǎn)化率達27.00%,經(jīng)16SrDNA分析鑒定其為植物乳桿菌(Lactobacillus plantaru)。② 對植物乳桿菌BC-25進行富硒與未富硒培養(yǎng)來制備EPS,經(jīng)過提取、分離純化和純度鑒定。結(jié)果顯示,試驗組和對照組EPS都只在經(jīng)0.2 mol/LNaCl分離后有主要吸收峰,Sepharose CL-6B分離后呈現(xiàn)單一對稱峰:紫外光譜掃描后在260 nm和280 nm處無吸收峰,表明純化后的EPS不含核酸和蛋白質(zhì);瓊脂糖凝膠電泳圖上出現(xiàn)單一色斑,說明EPS成分均勻,證明得到的是純EPS。③ 通過試驗組和對照組EPS的產(chǎn)量、溶解性、熱穩(wěn)定性、單糖組分、結(jié)構(gòu)的對比分析。結(jié)果表明,試驗組和對照組EPS均易溶于水,不溶于乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯、甲醇;產(chǎn)量比較,試驗組相對于對照組EPS產(chǎn)量提高了6.56%;示差掃描和熱重分析表明,試驗組的EPS熱穩(wěn)定降低;單糖組分分析表明,試驗組和對照組單糖組成都為D-甘露糖、D-半乳糖、D-葡萄糖,組成比例表明甘露糖都為主要單糖組成,試驗組EPS中D-甘露糖的比例增加,D-半乳糖和D-葡萄糖的比例降低,但這種變化并不明顯;1HNMR、13CNMR、紅外光譜、質(zhì)譜分析,試驗組和對照組EPS結(jié)構(gòu)基本相似,單糖連接方式一致,都是有較長碳鏈的吡喃多糖;1HNMR和13C NMR綜合分析,Se可能取代了-OCH3上的CH3,形成了Se=O和C-Se-C,使多糖中引入硒。
【關(guān)鍵詞】:植物乳桿菌 富硒 胞外多糖 結(jié)構(gòu)
【學(xué)位授予單位】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:TS201.3
【目錄】:
  • 摘要4-5
  • Abstract5-7
  • 縮略詞表7-10
  • 1 前言10-20
  • 1.1 立題背景10
  • 1.2 文獻綜述10-18
  • 1.2.1 乳酸菌胞外多糖簡介10-16
  • 1.2.2 硒多糖研究進展16-18
  • 1.3 研究目標18
  • 1.4 研究內(nèi)容18-20
  • 2 材料與方法20-27
  • 2.1 材料20-21
  • 2.1.1 菌種20
  • 2.1.2 培養(yǎng)基20
  • 2.1.3 試劑20
  • 2.1.4 儀器設(shè)備20-21
  • 2.2 方法21-27
  • 2.2.1 富硒乳酸菌的篩選與鑒定21-24
  • 2.2.2 富硒乳酸菌胞外多糖的提取、純化24-25
  • 2.2.3 富硒與未富硒乳酸菌胞外多糖比較分析25-27
  • 3 結(jié)果與分析27-56
  • 3.1 富硒乳酸菌的篩選與鑒定結(jié)果27-33
  • 3.1.1 生化鑒定結(jié)果28
  • 3.1.2 加硒時間和培養(yǎng)時間的確定28-29
  • 3.1.3 適宜硒濃度的確定29
  • 3.1.4 耐硒篩選結(jié)果29-30
  • 3.1.5 富硒能力測定結(jié)果30-31
  • 3.1.6 BC-25的16SrDNA分析結(jié)果31-33
  • 3.2 多糖純化結(jié)果分析33-37
  • 3.2.1 純化、洗脫結(jié)果33-35
  • 3.2.2 純度檢驗分析35-37
  • 3.3 富硒與未富硒乳酸菌胞外多糖比較分析37-56
  • 3.3.1 多糖產(chǎn)量比較37
  • 3.3.2 理化性質(zhì)比較37-40
  • 3.3.3 多糖組成結(jié)構(gòu)比較40-56
  • 3.3.4 一級結(jié)構(gòu)推測56
  • 4 結(jié)論與展望56-58
  • 4.1 結(jié)論56-57
  • 4.2 展望57-58
  • 參考文獻58-64
  • 致謝64-65
  • 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的文章目錄65

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  本文關(guān)鍵詞:富硒植物乳桿菌BC-25胞外多糖的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號:448102

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