惡劣的環(huán)境嚴(yán)重影響植物的正常生長(zhǎng)和發(fā)育進(jìn)程,為了適應(yīng)不利的環(huán)境變化,許多植物進(jìn)化出了復(fù)雜的調(diào)控機(jī)制,如改變植物激素的合成,通過信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)控基因表達(dá)來提高植物的抗逆性。AP2/ERF超家族是一類植物特有的轉(zhuǎn)錄因子家族,是多種脅迫反應(yīng)的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。為了探究AP2/ERF家族成員在新疆沙冬青抵抗逆境過程中的重要作用以及調(diào)控機(jī)制,本研究以新疆沙冬青為材料,通過基因克隆及課題組前期RNA-Seq獲得3個(gè)AP2/ERF基因序列,命名為AnEREBP1(MH260902.1)、AnEREBP2(MH260903.1)及AnEREBP3(JQ360514.1);同時(shí),利用生物信息學(xué)、實(shí)時(shí)熒光定量(qRT-PCR)及凝膠遷移率(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)等分析對(duì)這3個(gè)基因的潛在功能進(jìn)行了系統(tǒng)地分析,試驗(yàn)主要結(jié)論如下:1.通過cDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)(Rapid amplification of cDNA ends,RACE)技術(shù)以及染色體步移技術(shù)對(duì)新疆沙冬青AnEREBP3基因的全長(zhǎng)和啟動(dòng)子進(jìn)行克隆,通過簡(jiǎn)并引物克隆得到同源區(qū)段383 bp,進(jìn)...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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圖2-1序列拼接示意圖

沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文19圖2-1序列拼接示意圖Fig.2-1SequenceMosaicdiagram2.2.7啟動(dòng)子克隆2.2.7.1新疆沙冬青葉片DNA提取利用植物DNA提取試劑盒按照說明書提取新疆沙冬青DNA。2.2.7.2引物設(shè)計(jì)利用在線引物設(shè)計(jì)軟件Primer-BL....

圖2-2基因同源區(qū)擴(kuò)增電泳結(jié)果

沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文21圖2-2基因同源區(qū)擴(kuò)增電泳結(jié)果Fig.2-2Electrophoresisresultsofhomologousamplificationofthegene注：M:D2000Marker;1:AnEREBP3基因同源區(qū)擴(kuò)增片段2.3.1.2TA克隆菌落....

圖2-3菌落PCRFig.2-3ColonyPCR

沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文21圖2-2基因同源區(qū)擴(kuò)增電泳結(jié)果Fig.2-2Electrophoresisresultsofhomologousamplificationofthegene注：M:D2000Marker;1:AnEREBP3基因同源區(qū)擴(kuò)增片段2.3.1.2TA克隆菌落....

圖2-4同源區(qū)測(cè)序結(jié)果

沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文21圖2-2基因同源區(qū)擴(kuò)增電泳結(jié)果Fig.2-2Electrophoresisresultsofhomologousamplificationofthegene注：M:D2000Marker;1:AnEREBP3基因同源區(qū)擴(kuò)增片段2.3.1.2TA克隆菌落....

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