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FGF-2慢病毒載體介導的人羊膜間充質干細胞復合兔自體富血小板血漿促進腱—骨愈合的實驗研究

發(fā)布時間:2024-01-25 17:18
  目的:(1)探索不同濃度的FGF-2溶液對人羊膜間充質干細胞(Human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)向韌帶和骨誘導的效果。(2)探究FGF-2慢病毒載體轉染后的hAMSCs復合兔自體富血小板血漿(Platelet rich plasma,PRP)促進腱-骨愈合的可行性。方法:(1)通過酶消化法(2次胰酶消化,1次II型膠原酶消化)提取hAMSCs,連續(xù)傳代培養(yǎng),顯微鏡下觀察hAMSCs的細胞形態(tài),hAMSCs傳至第三代(P3代hAMSCs)可用于后續(xù)實驗;通過免疫熒光和流式細胞術對P3代hAMSCs進行鑒定。(2)用不同濃度(0,10,20,40 ng/ml)的FGF-2溶液對P3代hAMSCs進行誘導,CCK8法檢測不同濃度的FGF-2溶液對hAMSCs增殖的影響;誘導14天后,實時熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測不同濃度的FGF-2溶液誘導后的hAMSCs韌帶和成骨相關基因的表達情況;Western Blot/免疫熒光檢測不同濃度的FGF-2溶液誘導后的hAMSCs韌帶和成骨相關蛋白的表達;天狼猩紅染色檢測不同濃度的FGF-2...

【文章頁數(shù)】:80 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
中英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 人羊膜間充質干細胞的分離培養(yǎng)及鑒定
    材料與方法
    結果
    討論
    結論
第二部分 不同濃度的FGF-2溶液誘導人羊膜間充質干細胞及FGF-2慢病毒載體轉染人羊膜間充質干細胞
    材料與方法
    結果
    討論
    結論
第三部分 富血小板血漿的制備及激活
    材料與方法
    結果
    討論
    結論
第四部分 FGF-2慢病毒載體介導的人羊膜間充質干細胞復合兔自體富血小板血漿促進腱-骨愈合
    材料與方法
    結果
    討論
    結論
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝
作者簡介



本文編號:3885232

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