生物體在應(yīng)對(duì)病毒以及細(xì)菌等病原體感染與侵襲的過(guò)程中,有各種各樣的防御措施,主要包括非特異性的天然免疫和特異性的獲得性免疫。天然免疫系統(tǒng)通過(guò)模式識(shí)別受體識(shí)別病原體的核酸等成份從而激活細(xì)胞內(nèi)一系列信號(hào)通路,誘導(dǎo)干擾素和炎癥因子等抗病毒基因表達(dá),啟動(dòng)固有免疫和炎癥反應(yīng),進(jìn)而清除病原體。載脂蛋白B mRNA編輯催化多肽(Apolipoprotein B mRNA-editing catalytic polypeptide,APOBEC)是干擾素誘導(dǎo)的重要抗病毒蛋白之一。多數(shù)APOBEC蛋白都能通過(guò)脫氨酶的作用編輯DNA或RNA序列,致使病毒基因組大量突變而抑制病毒復(fù)制。APOBEC家族最早得到關(guān)注是由于其具有抑制HIV病毒復(fù)制的功能。深入的研究發(fā)現(xiàn)APOBEC家族成員在抵抗與人類緊密相關(guān)的許多病毒如乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人乳頭瘤病毒、人類嗜T細(xì)胞病毒的過(guò)程中發(fā)揮同樣重要的作用。人的APOBEC家族包括11個(gè)成員,除APOBEC2和APOBEC4外,其它APOBEC成員都能夠通過(guò)脫氨反應(yīng)使單鏈DNA(single-strand DNA,ssDNA)或RNA中的胞嘧啶脫氨轉(zhuǎn)化為尿嘧啶(C-t...

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 病毒感染與干擾素的關(guān)系
    1.2 干擾素
        1.2.1 干擾素的分類
        1.2.2 干擾素的發(fā)現(xiàn)
        1.2.3 干擾素的活性和治療用途
        1.2.4 干擾素的副作用
    1.3 癌癥與APOBEC3關(guān)系
    1.4 APOBEC家族
        1.4.1 APOBEC
        1.4.2 APOBEC3亞家族
        1.4.3 APOBEC3B
        1.4.4 APOBEC3G
    1.5 APOBEC3的致突變機(jī)制
    1.6 本課題主要研究?jī)?nèi)容
    1.7 本課題的目的和意義
第二章 材料和方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 細(xì)胞株
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及主要溶液配制
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)主要儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)(q RT-PCR)
        2.2.3 慢病毒轉(zhuǎn)染
        2.2.4 siRNA轉(zhuǎn)染
        2.2.5 細(xì)胞總蛋白質(zhì)提取
        2.2.6 Western blot實(shí)驗(yàn)
        2.2.7 免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)
        2.2.8 細(xì)胞周期檢測(cè)
        2.2.9 細(xì)胞凋亡檢測(cè)
        2.2.10 彗星實(shí)驗(yàn)
        2.2.11 MTT實(shí)驗(yàn)
        2.2.12 集落形成實(shí)驗(yàn)
第三章 干擾素誘導(dǎo)的APOBEC3蛋白對(duì)正常細(xì)胞的影響
    3.1 干擾素處理對(duì)APOBEC3家族表達(dá)的作用
        3.1.1 干擾素處理對(duì)APOBEC3家族m RNA表達(dá)水平影響
        3.1.2 干擾素處理對(duì)APOBEC3家族蛋白表達(dá)水平影響
    3.2 干擾素處理后對(duì)細(xì)胞相關(guān)影響
        3.2.1 構(gòu)建APOBEC3B高表達(dá)以及si APOBEC3B細(xì)胞系
        3.2.2 APOBEC3B表達(dá)對(duì)細(xì)胞周期的影響
        3.2.3 APOBEC3B表達(dá)對(duì)細(xì)胞凋亡的影響
        3.2.4 干擾素處理Beas2b細(xì)胞后細(xì)胞DNA損傷情況
        3.2.5 干擾素處理Beas2b細(xì)胞后對(duì)細(xì)胞存活及增殖的影響
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
致謝



本文編號(hào)：3754634