目的:Robo2是免疫球蛋白超家族Robos家族的成員之一,主要參與神經(jīng)軸突引導(dǎo)、樹突分支、神經(jīng)修復(fù)及神經(jīng)-肌肉接頭處細(xì)胞遷移的作用。本課題利用果蠅痛覺神經(jīng)元（簡(jiǎn)稱為C4da神經(jīng)元）作為研究對(duì)象,觀察Robo2對(duì)果蠅C4da神經(jīng)元軸突發(fā)育及應(yīng)激反應(yīng)的影響,為進(jìn)一步揭示Robo2的生物作用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:1.通過雜交建立適用于單細(xì)胞基因調(diào)控技術(shù)的轉(zhuǎn)基因果蠅體系。2.應(yīng)用GAL4/UAS特異性驅(qū)動(dòng)系統(tǒng),觀察過表達(dá)和突變Robo2對(duì)神經(jīng)元軸突形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響。3.觀察不同類型神經(jīng)元過表達(dá)Robo2對(duì)果蠅幼蟲逃避行為的影響。結(jié)果:1.在全部C4da神經(jīng)元上均過表達(dá)Robo2后,可導(dǎo)致單個(gè)C4da神經(jīng)元軸突末梢過度生長(zhǎng),包括ddaC、v’ada和vdaB（P<0.01）;在野生型背景下,只在單一C4da神經(jīng)元過表達(dá)Robo2時(shí),可導(dǎo)致單個(gè)C4da神經(jīng)元軸突末梢減少,即單一ddaC過表達(dá)Robo2可導(dǎo)致軸突末梢長(zhǎng)度及對(duì)側(cè)投射長(zhǎng)度均減少（P<0.001）。2.在行為學(xué)實(shí)驗(yàn)中,與對(duì)照組相比,過表達(dá)Robo2于全部C4da神經(jīng)元可引發(fā)果蠅幼蟲對(duì)于紫外線刺激的潛伏期縮短（P<0.001... 

【文章頁(yè)數(shù)】：55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
1 材料
    1.1 實(shí)驗(yàn)主要試劑、儀器
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)主要試劑
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)主要儀器
    1.2 果蠅培養(yǎng)基和實(shí)驗(yàn)試劑的配制
2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 GAL4/UAS表達(dá)系統(tǒng)
    2.2 FLP/FRT特異性重組系統(tǒng)
    2.3 單細(xì)胞基因調(diào)控技術(shù)
        2.3.1 Flip-out
        2.3.2 MARCM
    2.4 行為學(xué)實(shí)驗(yàn)方法
        2.4.1 果蠅基因型
        2.4.2 行為學(xué)實(shí)驗(yàn)方法
        2.4.3 行為學(xué)指標(biāo)
    2.5 神經(jīng)元軸突末梢測(cè)量方法
    2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
3 結(jié)果
    3.1 過表達(dá)Robo2對(duì)C4da神經(jīng)元形態(tài)的影響
    3.2 過表達(dá)Robo2和Robo2突變對(duì)果蠅幼蟲逃避行為的影響
    3.3 過表達(dá)Robo2于5-HT神經(jīng)元、蘑菇體、全部神經(jīng)元及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞等對(duì)果蠅幼蟲逃避行為的影響
    3.4 過表達(dá)Robo2對(duì)于5-HT神經(jīng)元,多巴胺神經(jīng)元形態(tài)的影響
    3.5 過表達(dá)Robo3對(duì)于C4da神經(jīng)元形態(tài)的影響
4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄A 附錄內(nèi)容名稱
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]過表達(dá)NF-κB家族蛋白對(duì)果蠅三齡幼蟲傷害性逃避反應(yīng)的影響[J]. 薛文娟,梁玉花,齊萌萌,曲鵬,張慶鎬,楊利敏.  解剖科學(xué)進(jìn)展. 2019(01)
[2]應(yīng)用GAL4/UAS異位表達(dá)系統(tǒng)篩選果蠅視覺基因的研究[J]. 楊治平,陳曉姣,李建波,郭抗蕭,嚴(yán)永旺,楊智英.  新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(01)
[3]Slit-Robo信號(hào)通路在神經(jīng)軸突生長(zhǎng)和血管新生中作用研究進(jìn)展[J]. 王曉鶴,周玉云,黃曉慧,馬學(xué)玲.  生物醫(yī)學(xué)工程與臨床. 2017(04)
[4]免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)教學(xué)實(shí)踐與體會(huì)[J]. 謝遠(yuǎn)杰,莫中成,李美香,龍雙漣.  基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)教育. 2017(02)
[5]催生諾貝爾獎(jiǎng)的昆蟲——果蠅[J]. 梁前進(jìn),王婷娜.  生物學(xué)通報(bào). 2015(11)
[6]神經(jīng)軸突導(dǎo)向分子Robo的功能及其分子作用機(jī)制研究進(jìn)展（英文）[J]. 李曉童,周啟升,于奇,趙曉,劉慶信.  生理學(xué)報(bào). 2014(03)
[7]Slit-Robo信號(hào)通路作用的研究進(jìn)展[J]. 李霖,卿國(guó)忠.  國(guó)際病理科學(xué)與臨床雜志. 2013(01)
[8]黑腹果蠅細(xì)胞譜系分析方法進(jìn)展[J]. 張柿平,薛雷.  遺傳. 2012(07)
[9]FLP/FRT位點(diǎn)特異性重組系統(tǒng)在高等真核生物中的研究進(jìn)展[J]. 趙愛春,龍定沛,譚兵,許龍霞,向仲懷.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(15)
[10]GAL4/UAS系統(tǒng)在轉(zhuǎn)基因技術(shù)中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 李春峰,夏慶友,周澤揚(yáng).  生物技術(shù). 2006(01)

博士論文
[1]免疫組織化學(xué)技術(shù)在雞三種病毒性腫瘤病鑒別診斷中的應(yīng)用[D]. 孫亞妮.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011

碩士論文
[1]FLP重組酶表達(dá)載體的構(gòu)建及其在FLP/FRT系統(tǒng)中的應(yīng)用[D]. 肖雪賓.吉林大學(xué) 2012



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