造血干細(xì)胞（HSC,Hematopoietic stem cell）是血液系統(tǒng)各種成熟細(xì)胞的最初來源,其通過自我更新來維持HSC群體的穩(wěn)定,通過定向分化產(chǎn)生各種造血祖細(xì)胞進(jìn)而分化成各種成熟血細(xì)胞。自我更新與分化的平衡是長期維持造血功能所必須的,其調(diào)控是個復(fù)雜的過程。轉(zhuǎn)錄因子是調(diào)控造血干細(xì)胞功能的驅(qū)動力,轉(zhuǎn)錄因子往往通過蛋白質(zhì)相互作用的方式發(fā)揮精確的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。EDAG（Erythroid differentiation-associated gene）是一種造血組織特異表達(dá)并可調(diào)節(jié)造血干細(xì)胞增殖與分化的重要轉(zhuǎn)錄輔助因子,具有雙重轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)活性。對EDAG結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn)該蛋白雖然可調(diào)節(jié)多種基因的表達(dá),但并不具備任何已知的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域,我們推測很可能是通過與其他轉(zhuǎn)錄因子相互作用,發(fā)揮轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。THAP11（Thanatos-associated protein11）是THAP家族中的一員,其是一種含有C2-CH鋅指DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域,能夠識別一段15bp（ACTACNNT CCCAG）左右雙鏈DNA序列的轉(zhuǎn)錄因子。已知THAP11在胚胎干細(xì)胞的存活及多能性維持中發(fā)揮重要作用,但在造血干... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：118 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
    1.轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)對HSC的影響
    2.線粒體與HSC命運
    3.ChIP/ChIP-Seq技術(shù)
    4.EDAG（Erythroid differentiation-associated gene）基因
    5.THAP11(Thanatos-associated protein 11)基因
第一部分 利用表達(dá)譜芯片篩選EDAG與THAP11敲低后表達(dá)變化基因
    1.引言
    2.材料與方法
        2.1 實驗材料
        2.2 實驗方法
    3.結(jié)果
        3.1 敲低THAP11 K562細(xì)胞株的建立
        3.2 敲低EDAG K562細(xì)胞株的建立
        3.3 基因表達(dá)譜芯片確定表達(dá)差異基因
        3.4 表達(dá)差異基因驗證及整合分析
    4.討論
第二部分 利用ChIP-Seq技術(shù)篩選EDAG與THAP1在染色體上的結(jié)合譜
    1.引言
    2.材料與方法
        2.1 實驗材料
        2.2 實驗方法
    3.結(jié)果
        3.1 ChIP條件的確定
        3.2 ChIP-seq確定靶基因
        3.3 EDAG/THAP11靶基因整合分析
    4.討論
第三部分 數(shù)據(jù)的整合、分析與驗證
    1.引言
    2.材料與方法
        2.1 實驗材料
        2.2 實驗方法
    3.結(jié)果
        3.1 數(shù)據(jù)的整合分析
        3.2 報告基因驗證EDAG/THAP11的調(diào)控作用
        3.3 EDAG/THAP11對線粒體的影響
    4.討論
第四部分THAP11條敲小鼠的制備與初步表型分析
    1.引言
    2 材料與方法
        2.1 實驗材料
        2.2 實驗方法
    3.結(jié)果
        3.1 Ronin條件性敲除小鼠鑒定
        3.2 Ronin~(loxp/+)Vav-Cre~(Tg）小鼠表型初步鑒定
    4.討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
個人簡歷
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]EDAG-1在白血病和淋巴瘤細(xì)胞株中的表達(dá)[J]. 周穎,許望翔,詹軼群,李長燕,徐誠望,鄭紅,李菲菲,楊曉明,汪思應(yīng).  癌癥. 2004(11)
[2]在NIH3T3細(xì)胞中高表達(dá)EDAG-1基因?qū)е录?xì)胞惡性轉(zhuǎn)化[J]. 閭軍,許望翔,汪思應(yīng),江巖,李長燕,蔡衛(wèi)民,楊曉明.  生物化學(xué)與生物物理學(xué)報. 2002(01)
[3]EDAG-1,一種與造血調(diào)控密切相關(guān)新基因的分離和確認(rèn)[J]. 閭軍,許望翔,汪思應(yīng),詹軼群,江巖,蔡衛(wèi)民,楊曉明.  生物化學(xué)與生物物理學(xué)報. 2001(06)



本文編號：3637662