溶菌酶又稱胞壁質酶,是一種天然的堿性蛋白質。溶菌酶不僅可以水解細菌細胞壁中的肽聚糖,導致細胞壁破裂,菌體溶解,而且能夠與病毒蛋白直接結合使病毒失活,因而具有抗菌、抗病毒、消炎等功效。溶菌酶還常被用作模型蛋白,用于研究蛋白質的構象、酶動力學及其與分子免疫間的關系等。目前,常用的溶菌酶檢測方法有酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）、高效液相色譜法（HPLC）、毛細管電泳法（CE）等。CE由于分析速度快、分離效率高、試劑消耗量少等優(yōu)點廣泛用于蛋白質的分離分析中。紫外檢測器（UV）是CE最常用的檢測方式,然而由于毛細管進樣體積小、檢測光程短,致使CE-UV的檢測靈敏度受到限制。為提高檢測靈敏度,在線富集技術應運而生。在線富集技術是通過調節(jié)目標分析物所處狀態(tài)以及儀器參數(shù)使分析物得到富集,從而達到提高檢測靈敏度的目的,具有操作簡便、價格低廉的優(yōu)點。本論文通過一步加熱法制備了一種對溶菌酶具有吸附/釋放功能的混合刷涂層毛細管,用于毛細管電泳在線富集溶菌酶以提高檢測靈敏度。主要內容如下:首先分別通過陽離子開環(huán)聚合和可逆加成-斷裂鏈轉移（RAFT）聚合合成聚（2-甲基-2-噁唑啉）（PMOXA）和不同鏈長的聚丙烯... 

【文章來源】：中國科學技術大學安徽省211工程院校985工程院校

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 緒論
    1.1 引言
    1.2 溶菌酶及其檢測方法
        1.2.1 溶菌酶簡介
        1.2.2 溶菌酶檢測方法
    1.3 毛細管電泳在線富集技術
        1.3.1 樣品堆積
        1.3.2 pH調節(jié)
        1.3.3 吹掃
        1.3.4 等速電泳
        1.3.5 毛細管涂層法
    1.4 毛細管涂層的制備方法
        1.4.1 非共價鍵涂層
        1.4.2 共價鍵涂層
    1.5 刺激響應性聚合物刷
        1.5.1 單組分聚丙烯酸刷及其在蛋白質的可控吸附中的應用
        1.5.2 刺激響應性混合刷及其在蛋白質的可控吸附中的應用
    1.6 甲基丙烯酸縮水甘油酯在材料表面改性的應用
    1.7 本課題研究意義和主要研究內容
第2章 基于聚(2-甲基-2-噁唑啉)和聚丙烯酸的混合刷涂層毛細管
    2.1 引言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 實驗試劑
        2.2.2 實驗儀器
        2.2.3 溶液的配制
        2.2.4 PMOXA-r-GMA和PAA-b-PGMA的合成與表征
        2.2.5 PMOXA-r-GMA/PAA-b-PGMA涂層毛細管的制備及其表面組成
        2.2.6 毛細管電滲流(EOF)和ζ電勢的測定
        2.2.7 異硫氰酸熒光素標記溶菌酶吸附/脫附實驗
    2.3 結果與討論
        2.3.1 PMOXA-r-GMA和PAA-b-PGMA的表征
        2.3.2 毛細管涂層的表征
        2.3.3 毛細管的ζ電勢
        2.3.4 PMOXA-r-GMA/PAA-b-PGMA涂層毛細管對溶菌酶的吸附/釋放
    2.4 本章小結
第3章 毛細管電泳在線富集溶菌酶
    3.1 引言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 實驗試劑
        3.2.2 實驗儀器
        3.2.3 溶液的配制
        3.2.4 PMOXA-r-GMA和PAA-b-PGMA的合成
        3.2.5 PMOXA-r-GMA/PAA-b-PGMA涂層毛細管的制備
        3.2.6 毛細管電泳在線富集溶菌酶
        3.2.7 方法學評價
    3.3 結果與討論
        3.3.1 PMOXA-r-GMA/PAA-b-PGMA涂層毛細管富集溶菌酶條件研究
        3.3.2 不同涂層毛細管在線富集溶菌酶
        3.3.3 方法學考察
        3.3.4 PMOXA-r-GMA/PAA-b-PGMA涂層毛細管的穩(wěn)定性
    3.4 本章小結
第4章 結論
參考文獻
致謝
在讀期間發(fā)表的學術論文



本文編號：3637219