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新型氧化硅固定化腈水合酶的制備及應用

發(fā)布時間:2022-01-10 22:35
  腈水合酶催化腈類化合物生成相應的酰胺類化合物,在工業(yè)生產丙烯酰胺、煙酰胺等化合物方面具有重要的應用。腈水合酶特異性高,利用其生產酰胺能耗低、副產物少。但是游離的腈水合酶穩(wěn)定性差、易失活、難以回收利用,將酶固定化可以很好地解決上述問題。氧化硅材料是最為常見的固定化酶載體之一,它形式多樣、無毒害、生物相容性好,被認為是適用于酶固定化的較為理想的載體。本研究以鈷型腈水合酶ES-NHT-118為模型酶,以氧化硅材料為載體,分別采用包埋法和固載化交聯酶聚集體(cross-linked enzyme aggregates,CLEAs)的方法進行酶的固定化。對固定化酶的制備過程、催化性能和穩(wěn)定性進行研究,并將兩種氧化硅固定化腈水合酶用于煙酰胺的制備。主要內容如下:(1)仿生氧化硅包埋固定化腈水合酶(Encapsulated NHase)的制備以及性能研究。以正硅酸甲酯為前驅體,聚二甲基二烯丙基氯化銨為催化劑,溫和快速地實現腈水合酶的包埋。固定化酶的顆粒直徑約為100 nm,包埋率高于98.0%,酶活回收率為26.7%?疾炝擞坞x酶與固定化酶的熱穩(wěn)定性、pH穩(wěn)定性、操作穩(wěn)定性以及儲藏穩(wěn)定性。與游離酶相... 

【文章來源】:河北工業(yè)大學天津市 211工程院校

【文章頁數】:71 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 腈水合酶
    1.2 氧化硅材料固定化酶
        1.2.1 氧化硅材料包埋固定化酶
        1.2.2 氧化硅材料吸附固定化酶
    1.3 煙酰胺
    1.4 本論文的選題思路及主要工作
第二章 仿生氧化硅包埋固定化腈水合酶的制備及性能研究
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 試劑
        2.2.2 儀器
        2.2.3 實驗方法
    2.3 結果與討論
        2.3.1 固定化酶的表征
        2.3.2 仿生氧化硅包埋固定化腈水合酶的酶學性能及穩(wěn)定性研究
    2.4 小結
第三章 介孔氧化硅固載化腈水合酶 CLEAs 的制備及性能研究
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 試劑
        3.2.2 儀器
        3.2.3 實驗方法
    3.3 結果與討論
        3.3.1 固定化酶載體的表征
        3.3.2 固定化酶的表征
        3.3.3 固定化條件的優(yōu)化
        3.3.4 介孔氧化硅固載化腈水合酶CLEAs的酶學性能及穩(wěn)定性研究
    3.4 小結
第四章 氧化硅固定化腈水合酶制備煙酰胺
    4.1 引言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 試劑
        4.2.2 儀器
        4.2.3 實驗方法
    4.3 結果與討論
        4.3.1 溫度對煙酰胺產率的影響
        4.3.2 pH對煙酰胺產率的影響
        4.3.3 酶活對煙酰胺產率的影響
        4.3.4 不同底物濃度下的反應進程曲線
        4.3.5 重復使用性
        4.3.6 動力學參數的測定
    4.4 小結
第五章 結論與主要創(chuàng)新點
    5.1 結論
    5.2 主要創(chuàng)新點
參考文獻
攻讀學位期間所取得的相關科研成果
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
[1]脂質體為模板仿生硅化固定葡萄糖氧化酶[J]. 朱亞男,姜艷軍,高靜,周麗亞,賀瑩,賈霏.  催化學報. 2013(04)



本文編號:3581542

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