目的:探究α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）表達(dá)與神經(jīng)干細(xì)胞（neural stem cells,NSCs）激活之間的關(guān)系及其潛在機(jī)制。方法:培養(yǎng)原代NSCs,鑒定ACTA2 siRNA對(duì)NSCs的轉(zhuǎn)染效率。將細(xì)胞分為空白對(duì)照組（Control）、陰性對(duì)照組（Scramble）、溶劑對(duì)照組（Vehicle）、ACTA2敲低組（ACTA2 siRNA）,觀察各組間NSCs增殖、分化、遷移的差異。進(jìn)一步檢測(cè)Rho家族（RhoA,Rac1,Cdc42）蛋白表達(dá)差異;用Rho相關(guān)蛋白激酶（ROCK）抑制劑Y27632干預(yù)ACTA2敲低的NSCs,觀察NSCs的遷移變化。結(jié)果:1.培養(yǎng)的原代NSCs具有良好的干性及多潛能分化能力,α-SMA可在NSCs中明顯表達(dá),且ACTA2 siRNA明顯下調(diào)了NSCs中α-SMA的表達(dá)。2.ACTA2 siRNA組Ki67陽性細(xì)胞百分比降低,NeuN蛋白表達(dá)降低,GFAP、Olig2蛋白表達(dá)升高,與Control、Scramble和Vehicle組相比均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p<0.01）。3.ACTA2 siRNA... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

α-SMA在NSCs中表達(dá)Figure2-1.α-SMAexpressedinNSCs

ACTA2siRNA下調(diào)NSCs中α-SMA表達(dá)Figure2-2.ACTA2siRNAdecreasedexpressionofα-SMAinNSCs

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文張吉22（A）Ki67（綠色）免疫染色,細(xì)胞核用藍(lán)色的DAPI復(fù)染。比例尺：100μm。（B）條形圖總結(jié)了每組中Ki67+細(xì)胞百分比定量（每組n=6）。*p<0.01。2.3.2α-SMA表達(dá)下調(diào)可抑制NSCs向神經(jīng)元的分化，促進(jìn)其向膠質(zhì)細(xì)胞分化使用ACTA2siRNA轉(zhuǎn)染NSCs下調(diào)中α-SMA表達(dá)后，Westernblot結(jié)果顯示與Control、Scramble和Vehicle組相比，ACTA2siRNA組NSCs的NeuN蛋白表達(dá)降低（圖3-2A、B，p<0.01），GFAP、Olig2表達(dá)升高（圖3-2A、C、D，p<0.01）。圖3-2：α-SMA下調(diào)抑制NSCs向神經(jīng)元分化，促進(jìn)NSCs向膠質(zhì)細(xì)胞分化Figure3-2.α-SMAdown-regulationinhibitedthedifferentiationofNSCsintoneuronsandpromotedNSCsdifferentiationintoglialcells（A）條帶代表NeuN、GFAP、Olig2的表達(dá)。GAPDH用作內(nèi)參對(duì)照。（B）定量來自（A）的NeuN表達(dá)（每組n＝3）。（C）從（A）定量Olig2表達(dá)（每組n=3）。（D）從（A）中量化GFAP表達(dá)（每組n=3）。*p<0.01。2.3.3α-SMA表達(dá)下調(diào)可抑制NSCs遷移

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Stem cells:a promising candidate to treat neurological disorders[J]. Chang-Geng Song,Yi-Zhe Zhang,Hai-Ning Wu,Xiu-Li Cao,Chen-Jun Guo,Yong-Qiang Li,Min-Hua Zheng,Hua Han.  Neural Regeneration Research. 2018(07)
[2]�；撬嵋种芌ho/ROCK信號(hào)通路活性促進(jìn)生長(zhǎng)受限胎鼠神經(jīng)干細(xì)胞增殖的研究[J]. 劉方,王燕,劉敬,馬麗亞,吳志軍,盧光進(jìn).  中華實(shí)用兒科臨床雜志. 2017 (02)
[3]間充質(zhì)干細(xì)胞遷移中的信號(hào)通路[J]. 黃生炫,劉窗溪.  醫(yī)學(xué)信息(上旬刊). 2011(04)
[4]神經(jīng)干細(xì)胞定向遷移機(jī)制研究新進(jìn)展[J]. 陳二濤,劉勇,馮東福,汪洋,李文生.  中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志. 2008 (01)
[5]肌動(dòng)蛋白與紐蛋白在神經(jīng)干細(xì)胞定向分化為神經(jīng)元過程中的表達(dá)[J]. 徐延豪,杜喆,石玉秀.  中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志. 2005(05)

博士論文
[1]Rho-GDIγ介導(dǎo)的神經(jīng)干細(xì)胞分化調(diào)控網(wǎng)絡(luò)及CDC50A-P4-ATPase相互作用與功能研究[D]. 王嬌.上海大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3252488