小分子熒光探針因結構可調控、特異性好、毒性小和可視化檢測等獨特的性能,已廣泛應用于生物學、醫(yī)學、藥理學和環(huán)境科學等各個領域。目前,已報道了各種熒光探針用于生物學或環(huán)境科學中某些物質的檢測。但是,在復雜的生物系統(tǒng)中,基于單個發(fā)射波長熒光強度信號的測量容易受到探針濃度、固有熒光、儀器和環(huán)境因素的影響,從而導致定量分析不準確;生物體系中不可避免的自吸收和自發(fā)熒光,使短波長發(fā)射的熒光探針不適合在組織和活體中進行深層成像,從而限制了它們在生物系統(tǒng)中的進一步應用。因此,本文通過設計比率或近紅外（640-900 nm）的熒光探針,最大程度上減小自發(fā)熒光、自吸收等背景干擾,以實現(xiàn)復雜生物樣品中活性物質的檢測,并分別以常見生物活性物質堿性磷酸酶（ALP）、過氧化氫（H₂O₂）和半胱氨酸（Cys）為研究對象,設計合成了三種不同類型的熒光探針,具體內容如下:（1）基于ALP可催化水解各種底物上磷酸基團的特異性,設計合成了一種可見光發(fā)射的比率型熒光探針2,4-雙（苯并[d]噻唑-2-基）苯基磷酸二氫鹽（PDP）用于ALP檢測。當加入ALP溶液時,PDP分子中的磷酸基... 

【文章來源】：湖南師范大學湖南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：137 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 小分子熒光探針
    1.3 小分子熒光探針的響應機制
    1.4 小分子熒光探針的分類
        1.4.1 紫外-可見光激發(fā)/發(fā)射小分子熒光探針
        1.4.2 可見光激發(fā)/近紅外發(fā)射小分子熒光探針
        1.4.3 近紅外激發(fā)/發(fā)射小分子熒光探針
    1.5 小分子熒光探針在生物活性物質檢測中的應用
        1.5.1 堿性磷酸酶熒光探針的研究進展
        1.5.2 過氧化氫熒光探針研究進展
        1.5.3 半胱氨酸熒光探針的研究進展
    1.6 本論文構思
第二章 一種可見光發(fā)射的比率型熒光探針用于堿性磷酸酶的檢測
    2.1 引言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 儀器與試劑
        2.2.2 探針PDP的合成及表征
        2.2.3 分析液的配置與檢測
        2.2.4 血清中ALP的檢測
    2.3 結果與討論
        2.3.1 探針的光譜性質及可行性研究
        2.3.2 檢測機理研究
        2.3.3 檢測條件優(yōu)化
        2.3.4 探針對ALP響應性能
        2.3.5 酶動力學考察
        2.3.6 選擇性考察
        2.3.7 ALP抑制劑考察
        2.3.8 實際樣品檢測
    2.4 本章小結
第三章 一種近紅外發(fā)射的熒光探針用于細胞及斑馬魚中過氧化氫的成像
    3.1 引言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 試劑與儀器
        3.2.2 探針DRP-B的合成及表征
        3.2.3 樣品的配置與檢測
        3.2.4 細胞毒性實驗
        3.2.5 細胞培養(yǎng)和熒光成像
        3.2.6 斑馬魚熒光成像
    3.3 結果與討論
        3.3.1 探針的光譜性質及可行性研究
        3.3.2 探針對H2O2檢測機理
        3.3.3 檢測條件優(yōu)化
        3.3.4 探針對H2O2的響應性能
        3.3.5 選擇性考察
        3.3.6 活細胞熒光成像
        3.3.7 斑馬魚的熒光成像
    3.4 本章小結
第四章 一種近紅外激發(fā)/發(fā)射的熒光探針用于細胞和斑馬魚中半胱氨酸的成像
    4.1 引言
    4.2 實驗部分
        4.2.1 試劑與儀器
        4.2.2 探針DXM的合成與表征
        4.2.3 檢測溶液的配置與檢測
        4.2.4 血清中Cys的檢測
        4.2.5 細胞毒性實驗
        4.2.6 細胞培養(yǎng)和熒光成像
        4.2.7 斑馬魚熒光成像
    4.3 結果與討論
        4.3.1 探針的光譜性質和可行性研究
        4.3.2 探針對Cys檢測機理
        4.3.3 檢測條件優(yōu)化
        4.3.4 探針對Cys的響應性能
        4.3.5 選擇性考察
        4.3.6 實際樣品檢測
        4.3.7 活細胞熒光成像
        4.3.8 斑馬魚的熒光成像
    4.4 本章小結
第五章 結語
    5.1 結論
    5.2 展望
參考文獻
附錄
    附錄1 攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術論文
    附錄2 常用縮寫一覽表
    附錄3 表格和相關化合物的圖譜
致謝



本文編號：3079113