利用木質(zhì)纖維素類生物質(zhì)降解轉(zhuǎn)化生產(chǎn)液體燃料和化學(xué)品是保障人類社會(huì)可持續(xù)發(fā)展的重要途徑。草酸青霉（Penicillium oxalicum）可產(chǎn)生完整的降解植物細(xì)胞壁多糖的木質(zhì)纖維素降解酶系,有效地將木質(zhì)纖維素水解成可溶性糖,用于生物燃料和多種化工產(chǎn)品的生產(chǎn)。蛋白質(zhì)的糖基化修飾在生命體中起著重要的作用,例如,參與翻譯調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)控、免疫保護(hù)、蛋白質(zhì)降解、細(xì)胞壁的合成等許多生物過(guò)程。探索蛋白質(zhì)的N-糖基化在纖維素降解真菌中的生物學(xué)功能,將加深對(duì)糖基化相關(guān)酶類功能和底物選擇性的認(rèn)識(shí),有助于總結(jié)真菌胞外分泌蛋白組中眾多酶組分糖基化修飾的基本狀態(tài)和普遍規(guī)律,使得人工調(diào)整糖基化結(jié)構(gòu)的路線變得可行,為提高纖維素降解酶的產(chǎn)量和生產(chǎn)特定N-糖鏈的纖維素降解酶提供新的思路。本論文以重要的纖維素降解酶生產(chǎn)真菌草酸青霉為研究對(duì)象,利用遺傳學(xué)、糖組學(xué)和分泌組學(xué)的研究方法,聚焦于幾種N-糖基化修飾酶的生物學(xué)功能研究,對(duì)N-糖基化修飾影響草酸青霉纖維素酶的合成進(jìn)行了初步探索。本論文的主要研究結(jié)果如下:1.α-1,3-葡萄苷酶Ⅱ的β亞基（α-1,3-glucosidaseⅡ,GlsⅡβ）對(duì)草酸青霉生長(zhǎng)、分泌蛋白N... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１Ｎ－連接的核心寡糖（ＨｅｌｅｎｉｕｓｅｔａＬ，?２００４）??Ｆｉｇ．?１－１?Ｔｈｅ?Ｎ－ｌｉｎｋｅｄ?ｃｏｒｅ?ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ??－ａｒｅ，１－１

?＂?ｕｃ＾，?ａ－＾ａｈｈｏｓｉｄ＾ｆｅ?▼?＾??．?Ｔ?Ｔ?ｘ??／＊Ｐｔ＞５?ｐ?？＞ａ？ｙ?ｌｙ?�。�?ｕ〇ｐ－?！?！?ＯＴ＊?Ｘ?Ｔ??ｉ?ｉ?—？ｉ?—？?ｉ?—？＞?塞—》?ｉ＊??＼ｌ?Ｕ?Ｖ＾／＜＾，Ｐｅ．＾５＾??＾?＾?＾?°ｒ＾?爹上爹??Ｖ－?，＿＾Ｊ?Ｔｕ５?ＦＵｄ?＼?／??＼?ＣＭＰ＾?ＵＯＦ＜ｓ?Ｘ－－ｗ—??８＊〇＜ｔｔ〇ｎ?０？?ｆ??？Ａ?Ｉ?Ｍａｒｖ６．Ｐ?ｒ？０？ｐｌｗ?ｉ?Ｉ??＾?—?ｖｔｖ??圖１－２真核生物Ｎ－糖基化修飾途徑（Ｖａｒｋｉｅｔａｌ．，２００９）??Ｆｉｇ．?１－２?Ｎ－ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ?ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｐａｔｈｗａｙ?ｉｎ?ｅｕｋａｒｙｏｔｅｓ??Ｎ－糖基化修飾包括Ｎ－糖鏈的生物合成、Ｎ－糖鏈轉(zhuǎn)移至新生多肽（蛋白質(zhì)）??以及Ｎ－糖鏈的修剪（圖１－２）。在ＥＲ中，當(dāng)寡糖轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)到合適的位點(diǎn)時(shí)，??即新生肽段的Ａｓｎ－Ｘ－Ｓｅｒ／Ｔｈｒ?（Ｘ是除Ｐｒｏ外的氨基酸）基序上的Ａｓｎ時(shí)，把預(yù)??組裝的ＬＬＯ整體轉(zhuǎn)移到此位點(diǎn)上，這個(gè)過(guò)程在真核生物中高度保守（Ｈｅｌｅｎｉｕｓｅｔ??ａｌ．，?２００４）。隨后，最外端的葡萄糖殘基ｎ被ａ－１，２－葡糖苷酶Ｉ迅速剪切，Ｎ－聚糖??鏈結(jié)構(gòu)變?yōu)椋牵欤悖玻停幔睿梗牵欤悖危粒悖�。這種快速去除在新形成的糖蛋白與寡糖基轉(zhuǎn)移酶??的分離中起重要作用（？６打６５＜：１１６１３１．，１９９４）。剩余的兩個(gè)以０１－１，３－連接的葡萄糖??殘基１１１、丨通過(guò)（１－１，３－葡糖苷酶１１的去葡糖基化作用被去除（１＜＿〇１＇１＾１（＾１３１．，１９８５）。??當(dāng)中間的葡萄糖殘基ｍ被去掉時(shí)，帶有

ＰＡＴＴＴＧＳＳＰＧＰ?ＴＯＳＨＹＧＯＣＧＧＩＧＹＳＧＰＴＶＣＡＳＧＴＴＣＱＶＬＮＰＹＹＳＱＣＬ??Ｎ－ｔｅｒ?４５?２７０?３８４?４３５?４６２?Ｃ．ｔｅｒ??ＣＤ?Ｌｉｎｋｅｒ?ＣＢＭ??祕(mì)Ｗ，７餐．：一％？讀??丄―一一一』ＵＪＪｉｉＬＵｌＧ?－ｕｕｉ４Ｕ＿Ｌ：ｕｕ??Ｎ－ｔｅｒ?３９?８７?９７?１０６?１２２?２８９?３１０?ＣＡｅｆ??ＣＢＭ?Ｌｉｎｋｅｒ?ＣＤ??Ｃｕｒｒｅｎｔ?Ｏｐｉｎｉｏｎ?ｉｎ?ＢｗｔｅｃｈｎｏＪｏｇｙ??圖１－７里氏木霉纖維二糖７家族與６家族糖基化結(jié)構(gòu)、分布示意圖（Ｂｅｃｋｈａｍ?ｅｔａｌ．，２０１２）??Ｆｉｇ．?１－７?Ｔｈｅ?ｐｒｏｃｅｓｓｉｖｅ?ｃｅｌｌｏｂｉｏｈｙｄｒｏｌａｓｅｓ?ｆｒｏｍ?Ｔ．?ｒｅｅｓｅｉ?Ｆａｍｉｌｙ?７?（ｔｏｐ）?ａｎｄ?Ｆａｍｉｌｙ?６?（ｂｏｔｔｏｍ）??ｃａｔａｌｙｔｉｃａｌｌｙ?ｅｎｇａｇｅｄ?ｏｎ?ａ?ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ?ｃｒｙｓｔａｌ?ａｎｄ?ｓｈｏｗｎ?ｗｉｔｈ?Ｎ－ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ?ａｎｄ?Ｏ－ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ??Ａｄｖａ等人通過(guò)對(duì)不同培養(yǎng)基中培養(yǎng)的ｃ／ｚｒｊ肌分泌蛋??白的糖基化位點(diǎn)分析，發(fā)現(xiàn)葡萄糖、纖維素和木素不僅誘導(dǎo)產(chǎn)生不同的蛋白，還??影響蛋白的糖基化水平（Ａｄａｖｅｔａｌ．，?２０１４）。對(duì)在木糖、葡萄糖及鹿??渣培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)后的類似研究中，也有相似的發(fā)現(xiàn)（Ｒｕｂｉｏ?ｅｔａｌ．，?２０１６）。??另外，不同真菌和相同真菌不同菌株所產(chǎn)的Ｎ－糖基化蛋白也有所不同??（Ｎｅｖａｌａｉｎｅｎ?ｅｔａｌ．，?１９９８），纖維素酶糖基化隨異源表達(dá)宿主（Ａｄｎｅｙ?ｅｔａｌ．，

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]青霉的纖維素酶抗降解物阻遏突變株的選育[J]. 曲音波,高培基,王祖農(nóng).  真菌學(xué)報(bào). 1984(04)

博士論文
[1]N-糖基化修飾對(duì)瑞氏木霉纖維二糖水解酶I分泌、酶活和蛋白穩(wěn)定性的影響及影響機(jī)制的研究[D]. 齊飛飛.山東大學(xué) 2014
[2]斜臥青霉胞外蛋白質(zhì)組學(xué)分析與纖維素酶合成調(diào)控機(jī)制研究[D]. 韋小敏.山東大學(xué) 2011

碩士論文
[1]里氏木霉內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白折疊途徑改造與異源蛋白BGLA和Lcc1的表達(dá)研究[D]. 高佳.山東大學(xué) 2018
[2]草酸青霉GH5、GH12家族纖維素酶的異源表達(dá)及其生理作用的研究[D]. 喻樂(lè)樂(lè).山東大學(xué) 2017



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