光系統(tǒng)II高分辨率晶體結(jié)構(gòu)從原子水平上揭示了包括Mn₄CaO₅簇在內(nèi)的蛋白復(fù)合體的結(jié)構(gòu),特別是一些重要的氨基酸它們可能在光合水氧化過(guò)程中有著重要的調(diào)控作用。其中D1蛋白中D1-N338和D1-S268分別是供體側(cè)錳簇和受體側(cè)非血素鐵的周圍氫鍵網(wǎng)絡(luò)上的重要氨基酸殘基,很可能參與光合水氧化過(guò)程中質(zhì)子的轉(zhuǎn)運(yùn)。為了研究它們?cè)谒趸^(guò)程中的功能,本文以嗜熱藍(lán)藻Thermosynechococcus vulcanus為研究材料,以D1-N338位點(diǎn)和D1-S268位點(diǎn)為主要研究對(duì)象,采用定點(diǎn)突變的方法,構(gòu)建了多個(gè)嗜熱藍(lán)藻位點(diǎn)突變體,并運(yùn)用波譜學(xué)、氧電極、葉綠素?zé)晒馑p動(dòng)力學(xué)等手段對(duì)突變體功能進(jìn)行了深入研究,揭示了這些氨基酸可能對(duì)維持正常的光合水氧化功能具有重要意義（嗜熱藍(lán)藻野生型含有3個(gè)同源基因同時(shí)編碼D1蛋白,分別是psbA₁、psbA₂、psbA₃。實(shí)驗(yàn)中我們選擇敲除psbA₁和psbA₂基因,獲得WT*（psbA₃–S... 

【文章來(lái)源】：河北科技大學(xué)河北省

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 緒論
    1.1 光合作用
    1.2 光系統(tǒng)PSⅡ結(jié)構(gòu)
4CaO₅）結(jié)構(gòu)">    1.3 放氧復(fù)合物錳簇（Mn₄CaO₅）結(jié)構(gòu)
    1.4 發(fā)生在PSⅡ中的電子傳遞和S態(tài)循環(huán)
    1.5 選題研究開(kāi)展的目的和意義
第2章 材料和方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 藻種
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 藻種的培養(yǎng)
r的定點(diǎn)突變">        2.2.2 質(zhì)粒載體pUC18-psbA3-Sm^r的定點(diǎn)突變
        2.2.3 藍(lán)藻細(xì)胞中導(dǎo)入定點(diǎn)突變質(zhì)粒載體（自然轉(zhuǎn)化法）
        2.2.4 突變體單克隆鑒定
        2.2.5 嗜熱藍(lán)藻光系統(tǒng)Ⅱ的提取
        2.2.6 葉綠素含量測(cè)定
        2.2.7 放氧活性測(cè)定
        2.2.8 藍(lán)藻突變體細(xì)胞光合自養(yǎng)生長(zhǎng)情況
        2.2.9 突變體藍(lán)藻細(xì)胞的光譜特征測(cè)定
        2.2.10 葉綠素?zé)晒馑p動(dòng)力學(xué)測(cè)定
        2.2.11 聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）
第3章 結(jié)果與分析
3–Sm^r質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)化">    3.1 pUC18-psbA₃–Sm^r質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)化
    3.2 突變體生長(zhǎng)曲線
    3.3 突變體細(xì)胞放氧活性測(cè)定
    3.4 突變體細(xì)胞pH依賴放氧活性
    3.5 室溫吸收光譜
    3.6 77K低溫?zé)晒夤庾V
    3.7 葉綠素?zé)晒夤庾V實(shí)驗(yàn)
    3.8 野生型藍(lán)藻和突變體光系統(tǒng)Ⅱ核心提取及樣品放氧活性
第4章 討論
    4.1 突變位點(diǎn)的選擇
    4.2 生長(zhǎng)曲線以及放氧活性測(cè)定
    4.3 閃光誘導(dǎo)葉綠素?zé)晒馑p動(dòng)力學(xué)測(cè)定電子傳遞速率
    4.4 突變體PSⅡ核心的提取及分析
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：2985569