【摘要】：抗菌肽(Antimicrobial peptides,AMPs)在許多生物體中自然存在,是針對(duì)外來微生物(例如真菌,細(xì)菌,病毒等)入侵的天然防御系統(tǒng)的主要活性成分之一�？咕谋憩F(xiàn)出廣譜抗菌活性,其抗菌機(jī)制獨(dú)特而復(fù)雜,不易導(dǎo)致耐藥性產(chǎn)生。本研究從豬脾臟中分離純化出新型抗菌肽,多肽合成后對(duì)其進(jìn)行抗菌活性檢測,從而篩選出活性較強(qiáng)的抗菌肽,而后通過一系列生物信息學(xué)相關(guān)軟件對(duì)其理化性質(zhì)、二級(jí)結(jié)構(gòu)、跨膜區(qū)、信號(hào)肽、細(xì)胞內(nèi)定位、修飾位點(diǎn)等方面特性進(jìn)行分析,為將其開發(fā)成新型抗菌藥物奠定基礎(chǔ)。本試驗(yàn)通過無菌操作方法獲得豬脾臟,運(yùn)用組織勻漿、超聲破碎、乙酸浸提和高速離心方法獲得脾臟粗提物,后經(jīng)陽離子交換層析和反向高效液相色譜(RP-HPLC)對(duì)粗提物進(jìn)行分離、純化,用大腸桿菌(ATCC8099)、金黃色葡萄球菌(ATCC6538)作為抗菌活性試驗(yàn)的指示菌株,獲得了一個(gè)抑菌活性較強(qiáng)的抗菌肽。經(jīng)MALDI-TOF-MS質(zhì)譜鑒定和序列比對(duì)分析得出,獲得該抗菌肽的氨基酸序列,將其命名為SSH19。利用多肽合成儀合成豬脾臟抗菌肽SSH19,進(jìn)行抗菌活性檢測。結(jié)果表明,合成的抗菌肽SSH19對(duì)大腸桿菌(ATCC8099)、金黃色葡萄球菌(ATCC6538)有很好的抑菌效果。通過生物信息學(xué)相關(guān)軟件對(duì)抗菌肽SSH19進(jìn)行理化特性、二級(jí)結(jié)構(gòu)、跨膜區(qū)、信號(hào)肽、胞內(nèi)定位、糖基化、泛素化、酶切位點(diǎn)和疏水性等相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,得出抗菌肽SSH19帶7個(gè)正電荷,存在兩個(gè)磷酸化位點(diǎn)、6個(gè)酶切位點(diǎn)、具親水性,存在76%螺旋區(qū)域。
【學(xué)位授予單位】：河南科技學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：Q51;Q811.4

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5 廖富，

本文編號(hào)：2625876