本文關鍵詞：斑馬魚hemgn基因的克隆、表達模式和功能初探，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《中國海洋大學》 2015年

斑馬魚hemgn基因的克隆、表達模式和功能初探

于丹丹  

【摘要】：Hemgn是一種定位于細胞核內的核蛋白,已有的研究表明它可能與哺乳動物的造血過程有關。在小鼠中,hemgn與人的EDAG (Embryonic Develop Associated Gene)及大鼠RP59高度同源,在胚胎發(fā)育過程中表達在卵黃囊的血島、原始造血細胞,胚胎肝組織、成年后主要表達在骨髓和脾臟。進一步的研究發(fā)現(xiàn),hemgn受GATA-1調控,且具有轉錄激活活性,可調節(jié)多種造血相關基因的表達。RP59在大鼠胚胎發(fā)育階段的表達與hemgn相似,但同時與大鼠的骨發(fā)育有關。在家禽雞中也存在其同源基因cHEMGN,它不僅表達于造血器官中,而且還表達于性腺中,推測它可能參與雞的性別分化。因此,hemgn是一種造血組織特異表達,對造血細胞增殖、分化起重要調控作用的新基因,參與了造血發(fā)生多個過程的調控。但目前對其作用機制尚缺乏深入的了解。與在哺乳動物中的研究相比,在魚類中還未見對hemgn基因的報道。本論文首先對斑馬魚hemgn基因進行了克隆和進化分析、然后對其組織分布、胚胎發(fā)育時期的時空表達進行了研究。序列分析顯示,斑馬魚hemgn基因全長1075bp,編碼198個氨基酸,它與其他脊椎動物物種的同源性較低,約為19%。共線性分析顯示,它與人、小鼠的同源基因都處于相似的基因座位上,因此,我們認為所克隆的基因即為斑馬魚的hemgn,命名為zhmgn。更進一步的進化分析顯示,hemgn僅存在于部分脊椎動物中,推測可能是進化過程中出現(xiàn)的一種新基因。用實時定量PCR實驗進行組織表達分析顯示,zhmgn基因的轉錄本在腎臟中的表達量最高,其次在肝臟、脾臟、腸及心臟中表達,在眼、肌肉和腦中的表達量相對較低。胚胎整體原位雜交顯示,受精卵發(fā)育到咽裂期之前(24hr),hemgn沒有檢測到轉錄本表達,在咽裂期之后有表達,在48hr表達于孵化腺,胸鰭以及鼻板處等部位。另外,zhmgn轉染人白血病細胞K562后發(fā)現(xiàn)細胞數目明顯減少,說明zhmgn對K562細胞生長有一定抑制作用。本文描述了zhmgn基因的組織表達以及胚胎時空表達模式,zhmgn具有抑制細胞生長(或可能有促進細胞凋亡的作用),這些結果為以后zhmgn基因功能的深入研究奠定了一定的基礎。

【關鍵詞】：
【學位授予單位】：中國海洋大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：Q78
【目錄】：

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