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產(chǎn)黑色素短梗霉P5菌株產(chǎn)重油的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-12-17 11:28

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【摘要】:隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,生物能源的相關(guān)研究備受關(guān)注,現(xiàn)階段其中備受看好的燃料乙醇和生物柴油在生產(chǎn)和使用上具有許多缺點(diǎn),比如生產(chǎn)成本高、能量密度低、熱值低。研究較多的微生物油脂位于細(xì)胞內(nèi),提取工藝復(fù)雜,在生產(chǎn)生物柴油上具有一定的應(yīng)用限制。烷烴廣泛存在于自然界中,在結(jié)構(gòu)和性質(zhì)上都與石油主要成分相似,現(xiàn)今發(fā)現(xiàn)一些細(xì)菌、真菌、微藻能產(chǎn)胞內(nèi)和胞外烴類,因此利用微生物直接產(chǎn)胞外烷烴具有重要的現(xiàn)實(shí)意義,能直接取代石油主要成分烷烴。海洋酵母是否可以產(chǎn)胞外烷烴是本研究的主要內(nèi)容。本研究從分離自紅樹(shù)林生態(tài)系統(tǒng)的100株海洋酵母菌中篩選出一株高產(chǎn)胞外重油的P5菌株,培養(yǎng)液中重油濃度最高為22.5 g/l。通過(guò)形態(tài)特征觀察、生理生化反應(yīng)、分子生物學(xué)3個(gè)方面的結(jié)果,P5菌株被鑒定為產(chǎn)黑色素短梗霉(Aureobasidium melanogenum).通過(guò)單因子實(shí)驗(yàn)法優(yōu)化P5菌株產(chǎn)重油的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件,確定P5菌株產(chǎn)重油的最佳培養(yǎng)基成分(w/v):12.0%葡萄糖,0.1%NH4N03,0.01%KH2PO4,0.02%MgS04·7H2O 0.05% KCl,0.1%玉米漿,培養(yǎng)時(shí)間為7 d,最優(yōu)條件下培養(yǎng)液中重油濃度達(dá)31.8 g/1,菌體生長(zhǎng)量達(dá)22.7 g/l。然后對(duì)P5菌株進(jìn)行10-1發(fā)酵罐發(fā)酵,經(jīng)168 h后,發(fā)酵液中重油濃度達(dá)32.5 g/l,菌體生長(zhǎng)量達(dá)23.0 g/l。用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀分析P5菌株所產(chǎn)重油的組成,發(fā)現(xiàn)其主要成分為C20以上的長(zhǎng)鏈正烷烴,其中二十六烷、二十七烷和二十八烷分別占8.65%、8.76%和32.31%。這是首次報(bào)道有關(guān)酵母菌可以產(chǎn)胞外長(zhǎng)鏈正烷烴。盡管本研究中P5菌株所產(chǎn)的正烷烴不能直接作為柴油和汽油原料,但可以作為石油精煉的原料,利用現(xiàn)有的石油精煉工藝通過(guò)催化劑催化制造生產(chǎn)不同碳鏈長(zhǎng)度的烷烴。分析6個(gè)可能的烷烴生物合成途徑,通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)產(chǎn)黑色素短梗霉(A.melanogenum)基因DNA中具有類似于植物合成長(zhǎng)鏈烷烴的CER6、CER1和CER3基因,這些基因編碼的氨基酸序列和催化結(jié)構(gòu)域也類似,推測(cè)產(chǎn)黑色素短梗霉(A.melanogenum)中可能存在類似于植物的烷烴合成途徑,不過(guò)還有待于進(jìn)一步驗(yàn)證。但是,用氣相色譜儀分析P5菌株所產(chǎn)的胞內(nèi)油脂成分,發(fā)現(xiàn)其主要成分是C16:0(21.2%)、C16:1(2.8%)、C18:0 (2.9%),、C18:1(39.8%)、C18:2(33.3%),與植物和其他酵母菌油脂的成分相似,是制備生物柴油的良好來(lái)源,而沒(méi)有長(zhǎng)鏈烷烴。
【學(xué)位授予單位】:中國(guó)海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:Q939.97

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1299969

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