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三聚氰胺的遺傳毒效應(yīng)及牛奶中三聚氰胺快速檢測方法研究

發(fā)布時間:2023-07-27 08:44
  三聚氰胺是一種三嗪類含氮雜環(huán)化工原料,因其含氮量高達66.6%,所以被非法添加到蛋白類食品、飼料甚至牛奶中,從而導(dǎo)致了2007年美國的寵物中毒事件以及2008年震驚中外的三鹿奶粉事件,社會反響極其惡劣。盡管有關(guān)三聚氰胺的急性毒性,亞慢性毒性和慢性毒性研究較多,但都集中在泌尿系統(tǒng),對其遺傳毒效應(yīng)的研究報道卻很少,此外,傳統(tǒng)的三聚氰胺色譜檢測方法和目前研發(fā)的拉曼散射,熒光,吸收光譜等光學(xué)檢測法,均因儀器昂貴,操作繁瑣,無法滿足現(xiàn)場檢測要求。因此,本論文深入研究了三聚氰胺及其主要代謝產(chǎn)物三聚氰酸的遺傳毒效應(yīng),為探明三聚氰胺對人體健康的影響提供了科學(xué)依據(jù);同時,利用的納米金和適配體修飾的納米金為傳感器,開發(fā)了三聚氰胺簡便、快速的檢測方法,為嚴格控制和監(jiān)管三聚氰胺的濫用情況提供了技術(shù)依托。 主要研究結(jié)果如下: 采用不同濃度的三聚氰胺進行Ames試驗,無論有沒有大鼠肝勻漿S-9混合液,其對TA97,TA98,TA100,TA102四種菌株的誘變回變菌落數(shù)均沒有超過自發(fā)回變菌落數(shù)的2倍(MR小于2)。在Ames試驗的基礎(chǔ)上,又進行三聚氰胺的倉鼠卵巢細胞(CHO)染色體畸變試驗,結(jié)果表明,各劑量組的細...

【文章頁數(shù)】:114 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
目錄
圖表清單
縮略表
第一章 緒論
    1.1 三聚氰胺的概述
        1.1.1 三聚氰胺的性質(zhì)
        1.1.2 三聚氰胺的用途
        1.1.3 國內(nèi)外三聚氰胺事件
    1.2 三聚氰胺的毒理學(xué)研究進展
        1.2.1 三聚氰胺的毒性研究進展
        1.2.2 三聚氰胺的代謝機制
        1.2.3 三聚氰胺的中毒機制
    1.3 三聚氰胺的檢測方法
        1.3.1 容量分析法
        1.3.2 色譜分析法
        1.3.3 免疫化學(xué)分析法
        1.3.4 光學(xué)分析法
    1.4 納米金和核酸適配體在分析檢測領(lǐng)域的應(yīng)用
        1.4.1 納米金在分析檢測領(lǐng)域的應(yīng)用
        1.4.2 適配體傳感器技術(shù)在分析領(lǐng)域的應(yīng)用
    1.5 研究目的意義及主要研究內(nèi)容
        1.5.1 論文研究背景及意義
        1.5.2 論文主要研究內(nèi)容
        1.5.3 論文的技術(shù)路線
第二章 三聚氰胺的 Ames 試驗和倉鼠卵巢細胞染色體畸變試驗
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 材料
        2.2.2 試驗方法
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 三聚氰胺 Ames 試驗結(jié)果
        2.3.2 染色體畸變試驗結(jié)果
    2.4 小結(jié)
        2.4.1 Ames 試驗方法評價
        2.4.2 染色體畸變試驗方法評價及注意事項
        2.4.3 試驗結(jié)果討論
第三章 三聚氰胺及其代謝產(chǎn)物對小鼠骨髓嗜多染紅細胞的微核效應(yīng)
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 材料
        3.2.2 試驗方法
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 三聚氰酸對小鼠骨髓嗜多染紅細胞的微核效應(yīng)
        3.3.2 三聚氰胺對小鼠骨髓嗜多染紅細胞的微核效應(yīng)
    3.4 小結(jié)
        3.4.1 試驗方法評價及注意事項
        3.4.2 試驗結(jié)果討論
第四章 三聚氰胺對小鼠睪丸細胞的 DNA 損傷
    4.1 引言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 材料
        4.2.2 試驗方法
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 細胞顯微圖像與 DNA 損傷
        4.3.2 三聚氰胺對小鼠睪丸細胞 DNA 損傷程度的影響
    4.4 小結(jié)
        4.4.1 SCGE 技術(shù)評價
        4.4.2 三聚氰胺對小鼠睪丸細胞 DNA 損傷評價
        4.4.3 三聚氰胺的遺傳毒效應(yīng)綜合評價
第五章 納米金比色法檢測牛奶中三聚氰胺
    5.1 引言
    5.2 儀器與試劑
        5.2.1 試驗儀器
        5.2.2 試劑
    5.3 實驗方法
        5.3.1 AuNPs 的制備
        5.3.2 反應(yīng)條件對 AuNPs 顆粒粒徑大小的影響
        5.3.3 AuNPs 檢驗牛奶中三聚氰胺原理及表征試驗
        5.3.4 基于 AuNPs 的快速檢測方法的優(yōu)化
        5.3.5 快速檢測方法的建立及驗證
        5.3.6 牛奶樣品的前處理研究
    5.4 結(jié)果與分析
        5.4.1 反應(yīng)條件對 AuNPs 顆粒粒徑大小的影響結(jié)果
        5.4.2 AuNPs 檢驗牛奶中三聚氰胺的原理及表征試驗結(jié)果
        5.4.3 基于 AuNPs 的快速檢測方法的優(yōu)化結(jié)果
        5.4.4 牛奶中三聚氰胺檢測標準曲線的建立
        5.4.5 牛奶樣品中三聚氰胺的檢測
        5.4.6 牛奶樣品的前處理研究
    5.5 小結(jié)
        5.5.1 納米金制備的注意事項
        5.5.2 納米金比色法檢測牛奶中三聚氰胺方法綜合評價
第六章 適配體修飾的納米金比色法檢測三聚氰胺
    6.1 引言
    6.2 儀器與試劑
        6.2.1 試驗儀器
        6.2.2 試劑
    6.3 試驗方法
        6.3.1 AuNPs 的制備
        6.3.2 樣品前處理
        6.3.3 反應(yīng)體系的表征試驗
        6.3.4 基于適配體修飾的納米金快速檢測方法的優(yōu)化
        6.3.5 檢測方法的建立及方法學(xué)考察
    6.4 結(jié)果與分析
        6.4.1 適配體修飾的 AuNPs 檢測三聚氰胺的原理
        6.4.2 圓二色譜光譜特征
        6.4.3 AuNPs 的透射電鏡掃描
        6.4.4 溶液離子強度對反應(yīng)體系的影響
        6.4.5 體系 aptamer 和 PDDA 濃度的優(yōu)化結(jié)果
        6.4.6 反應(yīng)時間的優(yōu)化結(jié)果
        6.4.7 檢測方法的靈敏度
        6.4.8 檢測方法的專一性
        6.4.9 本傳感器與類似傳感器的比較
        6.4.10 牛奶樣品的加標回收率試驗及與傳統(tǒng)方法的比較
    6.5 小結(jié)
第七章 總結(jié)與展望
    7.1 總結(jié)
    7.2 創(chuàng)新點
    7.3 展望
參考文獻
致謝
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授權(quán)專利



本文編號:3837701

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