環(huán)境濃度磷酸三(1,3-二氯-2-丙基)酯暴露對斑馬魚生長和生殖的影響
發(fā)布時(shí)間:2023-03-18 14:36
近年來,由于世界范圍內(nèi)對溴系阻燃劑的禁用,有機(jī)磷阻燃劑作為其替代品廣泛地應(yīng)用于建筑、紡織、化工、電子以及家裝材料等行業(yè)。磷酸三(1,3-二氯-2-丙基)酯(TDCIPP)作為典型的有機(jī)磷阻燃劑,近些年來生產(chǎn)量及使用量都顯著增加。由于該類阻燃劑通常是以物理添加方式添加到材料中,而非以較穩(wěn)定的共價(jià)鍵作用,從而很容易釋放到環(huán)境中。目前在世界各國飲用水、河流、生活污水中都可以檢測到TDCIPP的存在,其濃度范圍從幾十到幾千ng/L。然而目前有關(guān)TDCIPP的研究主要集中在高濃度的急性暴露實(shí)驗(yàn)所導(dǎo)致的各種毒性,這些實(shí)驗(yàn)所用濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于自然環(huán)境中存在的濃度。針對有機(jī)磷阻燃劑TDCIPP的使用可能對生態(tài)環(huán)境和人類健康帶來的潛在危害,故本研究以斑馬魚為活體模型,進(jìn)行毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)。本研究使用環(huán)境濃度(50、500和5000 ng/L)的TDCIPP對斑馬魚進(jìn)行長期暴露,通過研究下丘腦-垂體-甲狀腺(HPT)軸、生長激素/胰島素樣生長因子(GH/IGF)軸和下丘腦-垂體-性腺(HPG)軸的影響來綜合評價(jià)其對斑馬魚生長和生殖的影響,主要研究結(jié)果如下:1.環(huán)境濃度的TDCIPP暴露抑制了雌性斑馬魚的個(gè)體發(fā)育,降...
【文章頁數(shù)】:126 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略語表
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 阻燃劑簡介
1.2 環(huán)境中常見有機(jī)磷阻燃劑來源與分布
1.2.1 空氣
1.2.2 水體
1.2.3 土壤
1.2.4 生物體
1.3 典型有機(jī)磷阻燃劑TDCIPP毒理學(xué)研究
1.4 魚類內(nèi)分泌系統(tǒng)
1.4.1 生長激素/胰島素樣生長因子(GH/IGF)軸
1.4.2 下丘腦-垂體-甲狀腺(HPT)軸
1.4.3 下丘腦-垂體-性腺(HPG)軸
1.5 斑馬魚簡介
1.6 本研究的目的和意義
第二章 環(huán)境濃度TDCIPP慢性暴露對斑馬魚生殖的影響
2.1 前言
2.2 材料與方法
2.2.1 主要試劑
2.2.2 TDCIPP暴露溶液配制
2.2.3 斑馬魚的飼養(yǎng)及TDCIPP暴露
2.2.4 取樣
2.2.5 水樣和組織樣中TDCIPP和BDCIPP的測定
2.2.6 斑馬魚性腺組織學(xué)切片制作
2.2.7 斑馬魚血漿中性激素含量的測定
2.2.8 基因表達(dá)
2.2.8.1 引物設(shè)計(jì)
2.2.8.2 總RNA提取
2.2.8.3 反轉(zhuǎn)錄
2.2.8.4 熒光定量PCR
2.2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
2.3 結(jié)果
2.3.1 TDCIPP和BDCIPP在水樣中的濃度
2.3.2 TDCIPP和BDCIPP在組織樣中的濃度
2.3.3 累積產(chǎn)卵量
2.3.4 環(huán)境濃度TDCIPP暴露抑制雌性斑馬魚生長
2.3.5 環(huán)境濃度TDCIPP暴露對斑馬魚血漿性激素?zé)o影響
2.3.6 性腺組織學(xué)檢查
2.3.7 環(huán)境濃度TDCIPP暴露對HPG軸基因表達(dá)無影響
2.3.8 環(huán)境濃度TDCIPP暴露改變了GH/IGF軸的基因表達(dá)
2.3.9 相關(guān)分析
2.4 討論
第三章 環(huán)境濃度TDCIPP慢性暴露對斑馬魚生長發(fā)育的影響
3.1 前言
3.2 材料與方法
3.2.1 主要試劑
3.2.2 TDCIPP暴露溶液配制
3.2.3 斑馬魚的飼養(yǎng)、生長曲線及TDCIPP暴露
3.2.4 取樣
3.2.5 斑馬魚血漿甲狀腺激素含量的測定
3.2.6 基因表達(dá)
3.2.6.1 引物設(shè)計(jì)
3.2.6.2 總RNA提取
3.2.6.3 反轉(zhuǎn)錄
3.2.6.4 熒光定量PCR
3.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
3.3 結(jié)果
3.3.1 斑馬魚生長曲線
3.3.2 環(huán)境濃度TDCIPP暴露抑制雌性斑馬魚生長,并具有時(shí)間和劑量依賴性
3.3.2.1 30 dpf
3.3.2.2 60 dpf
3.3.2.3 90 dpf
3.3.2.4 120 dpf
3.3.3 環(huán)境濃度TDCIPP暴露改變GH/IGF軸基因表達(dá),但不改變HPT軸基因表達(dá)
3.3.3.1 30 dpf
3.3.3.2 60 dpf
3.3.3.3 90 dpf
3.3.3.4 120 dpf
3.3.4 環(huán)境濃度TDCIPP暴露對斑馬魚血漿甲狀腺激素?zé)o影響
3.4 討論
第四章 全文總結(jié)及展望
4.1 全文總結(jié)
4.2 展望
參考文獻(xiàn)
在校期間發(fā)表論文
致謝
本文編號:3763317
【文章頁數(shù)】:126 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略語表
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 阻燃劑簡介
1.2 環(huán)境中常見有機(jī)磷阻燃劑來源與分布
1.2.1 空氣
1.2.2 水體
1.2.3 土壤
1.2.4 生物體
1.3 典型有機(jī)磷阻燃劑TDCIPP毒理學(xué)研究
1.4 魚類內(nèi)分泌系統(tǒng)
1.4.1 生長激素/胰島素樣生長因子(GH/IGF)軸
1.4.2 下丘腦-垂體-甲狀腺(HPT)軸
1.4.3 下丘腦-垂體-性腺(HPG)軸
1.5 斑馬魚簡介
1.6 本研究的目的和意義
第二章 環(huán)境濃度TDCIPP慢性暴露對斑馬魚生殖的影響
2.1 前言
2.2 材料與方法
2.2.1 主要試劑
2.2.2 TDCIPP暴露溶液配制
2.2.3 斑馬魚的飼養(yǎng)及TDCIPP暴露
2.2.4 取樣
2.2.5 水樣和組織樣中TDCIPP和BDCIPP的測定
2.2.6 斑馬魚性腺組織學(xué)切片制作
2.2.7 斑馬魚血漿中性激素含量的測定
2.2.8 基因表達(dá)
2.2.8.1 引物設(shè)計(jì)
2.2.8.2 總RNA提取
2.2.8.3 反轉(zhuǎn)錄
2.2.8.4 熒光定量PCR
2.2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
2.3 結(jié)果
2.3.1 TDCIPP和BDCIPP在水樣中的濃度
2.3.2 TDCIPP和BDCIPP在組織樣中的濃度
2.3.3 累積產(chǎn)卵量
2.3.4 環(huán)境濃度TDCIPP暴露抑制雌性斑馬魚生長
2.3.5 環(huán)境濃度TDCIPP暴露對斑馬魚血漿性激素?zé)o影響
2.3.6 性腺組織學(xué)檢查
2.3.7 環(huán)境濃度TDCIPP暴露對HPG軸基因表達(dá)無影響
2.3.8 環(huán)境濃度TDCIPP暴露改變了GH/IGF軸的基因表達(dá)
2.3.9 相關(guān)分析
2.4 討論
第三章 環(huán)境濃度TDCIPP慢性暴露對斑馬魚生長發(fā)育的影響
3.1 前言
3.2 材料與方法
3.2.1 主要試劑
3.2.2 TDCIPP暴露溶液配制
3.2.3 斑馬魚的飼養(yǎng)、生長曲線及TDCIPP暴露
3.2.4 取樣
3.2.5 斑馬魚血漿甲狀腺激素含量的測定
3.2.6 基因表達(dá)
3.2.6.1 引物設(shè)計(jì)
3.2.6.2 總RNA提取
3.2.6.3 反轉(zhuǎn)錄
3.2.6.4 熒光定量PCR
3.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
3.3 結(jié)果
3.3.1 斑馬魚生長曲線
3.3.2 環(huán)境濃度TDCIPP暴露抑制雌性斑馬魚生長,并具有時(shí)間和劑量依賴性
3.3.2.1 30 dpf
3.3.2.2 60 dpf
3.3.2.3 90 dpf
3.3.2.4 120 dpf
3.3.3 環(huán)境濃度TDCIPP暴露改變GH/IGF軸基因表達(dá),但不改變HPT軸基因表達(dá)
3.3.3.1 30 dpf
3.3.3.2 60 dpf
3.3.3.3 90 dpf
3.3.3.4 120 dpf
3.3.4 環(huán)境濃度TDCIPP暴露對斑馬魚血漿甲狀腺激素?zé)o影響
3.4 討論
第四章 全文總結(jié)及展望
4.1 全文總結(jié)
4.2 展望
參考文獻(xiàn)
在校期間發(fā)表論文
致謝
本文編號:3763317
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