本文以從山西陽(yáng)泉所采集的煤矸石中提取分離出的氧化亞鐵硫桿菌為主要研究對(duì)象，采用現(xiàn)場(chǎng)采樣、室內(nèi)實(shí)驗(yàn)、模擬實(shí)驗(yàn)相結(jié)合的方法，針對(duì)酸性煤矸石環(huán)境污染問(wèn)題，在不同溫度、環(huán)境中的氧化亞鐵硫桿菌上施用不同比例殺菌劑進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，在分別研究單一殺菌劑機(jī)理的基礎(chǔ)上，復(fù)合兩種功能互補(bǔ)有協(xié)同作用的殺菌劑，并考察其殺菌效果和機(jī)理，篩選出最佳比例和條件的復(fù)合殺菌劑。煤矸石山上存在氣候環(huán)境變化問(wèn)題，殺菌劑的作用不能持久且容易失效，因此對(duì)復(fù)合殺菌劑進(jìn)行保水劑的緩釋處理，進(jìn)一步篩選最佳比例和條件的針對(duì)氧化亞鐵硫桿菌的緩釋復(fù)合殺菌劑并應(yīng)用于實(shí)際，為酸性自燃煤矸石山的原位控制與生態(tài)重建提供依據(jù)。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)礦業(yè)大學(xué)(北京)北京市 211工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
詳細(xì)摘要
Detailed Abstract
1 緒論
    1.1 選題背景及研究意義
        1.1.1 選題背景
        1.1.2 研究意義
    1.2 氧化亞鐵硫桿菌及其殺菌劑概況
        1.2.1 氧化亞鐵硫桿菌的生物學(xué)特性
        1.2.2 殺菌劑的分類
    1.3 利用殺菌劑控制煤矸石山酸性污染現(xiàn)狀
        1.3.1 國(guó)外研究現(xiàn)狀
        1.3.2 國(guó)內(nèi)研究現(xiàn)狀
    1.4 研究?jī)?nèi)容和技術(shù)路線
        1.4.1 主要研究?jī)?nèi)容
        1.4.2 技術(shù)路線
    1.5 本章小結(jié)
2 氧化亞鐵硫桿菌富集分離與純化鑒定
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 樣品來(lái)源
        2.1.2 感受態(tài)菌株與質(zhì)粒
        2.1.3 酶、試劑、引物和 DNA 序列測(cè)定
        2.1.4 主要培養(yǎng)基
        2.1.5 主要試劑的配制
        2.1.6 主要儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 菌種的培養(yǎng)和初期篩選
        2.2.2 總 DNA 的提取
        2.2.3 樣品基因組 16S rDNA 的擴(kuò)增
        2.2.4 瓊脂糖凝膠的配制
        2.2.5 瓊脂糖凝膠電泳及切膠
        2.2.6 擴(kuò)增產(chǎn)物的回收、純化及回收率的檢測(cè)
        2.2.7 回收后產(chǎn)物和 pEASY-T3 質(zhì)粒的連接及轉(zhuǎn)化
        2.2.8 感受態(tài)細(xì)胞的檢測(cè)
        2.2.9 陽(yáng)性克隆樣本的選擇、菌落 PCR 及 PCR 產(chǎn)物的檢測(cè)
        2.2.10 菌落 PCR 陽(yáng)性產(chǎn)物的 ALU1 酶切和酶切產(chǎn)物的檢測(cè)
        2.2.11 酶切圖譜的統(tǒng)計(jì)分類和對(duì)應(yīng)菌落的測(cè)序
        2.2.12 基因數(shù)據(jù)的比對(duì)
        2.2.13 雙層固體平板（iFeO）純化菌種
        2.2.14 氧化亞鐵硫桿菌的大量培養(yǎng)
        2.2.15 總 DNA 的提取
        2.2.16 基因組 16S rDNA 的擴(kuò)增
        2.2.17 瓊脂糖凝膠電泳驗(yàn)證及切膠
        2.2.18 擴(kuò)增產(chǎn)物的回收、純化及回收率檢測(cè)
        2.2.19 PCR 純化產(chǎn)物的測(cè)序
        2.2.20 基因數(shù)據(jù)的比對(duì)
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 菌種的培養(yǎng)
        2.3.2 樣品基因組 16S rDNA 的擴(kuò)增、電泳驗(yàn)證及純化回收
        2.3.3 感受態(tài)細(xì)胞的檢測(cè)
        2.3.4 陽(yáng)性克隆樣本的選擇
        2.3.5 陽(yáng)性克隆的菌落 PCR
        2.3.6 菌落 PCR 陽(yáng)性產(chǎn)物的 ALU1 酶切和酶切產(chǎn)物的驗(yàn)證
        2.3.7 酶切圖譜的統(tǒng)計(jì)分類和對(duì)應(yīng)菌落的測(cè)序
        2.3.8 基因數(shù)據(jù)的比對(duì)結(jié)果
        2.3.9 雙層固體平板（iFeO）純化菌種
        2.3.10 菌種的活化培養(yǎng)
        2.3.11 基因組 16S rDNA 的擴(kuò)增
        2.3.12 PCR 產(chǎn)物的測(cè)序
        2.3.13 基因數(shù)據(jù)的比對(duì)
    2.4 本章小結(jié)
3 玉潔純、卡松和 SDS 的抑菌作用
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 菌種選擇
        3.1.2 培養(yǎng)基
        3.1.3 殺菌劑
        3.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 最小抑菌濃度的確定
        3.2.2 單一殺菌劑對(duì) A. f 菌殺菌的穩(wěn)定性研究
        3.2.3 菌體內(nèi)蛋白、超微結(jié)構(gòu)與脂質(zhì)的檢測(cè)
        3.2.4 不同單一殺菌劑對(duì) A. f 菌鐵氧化酶的抑制
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 卡松和玉潔純分別最佳施用濃度
        3.3.2 不同環(huán)境中單一殺菌劑對(duì) A. f 菌的抑菌率
        3.3.3 菌體內(nèi)蛋白、超微結(jié)構(gòu)與脂質(zhì)的檢測(cè)
        3.3.4 不同單一殺菌劑對(duì) A. f 菌鐵氧化酶的抑制情況
    3.4 本章小結(jié)
4 復(fù)合殺菌劑卡松/SDS 和玉潔純/SDS 的抑菌作用
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.1 菌種
        4.1.2 培養(yǎng)基
        4.1.3 殺菌劑
        4.1.4 實(shí)驗(yàn)用具
        4.1.5 實(shí)驗(yàn)儀器
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 卡松/SDS、玉潔純/SDS 的最佳施用比例
        4.2.2 復(fù)合殺菌劑對(duì) A. f 菌的抑菌穩(wěn)定性
        4.2.3 復(fù)合殺菌劑與單一殺菌劑殺菌效果對(duì)比
        4.2.4 復(fù)合殺菌劑與單一殺菌劑對(duì) A. f 菌氧化 Fe~(2+)性能的影響對(duì)比
        4.2.5 復(fù)合殺菌劑與單一殺菌劑抑菌圈對(duì)比
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 加入不同比例兩種復(fù)合殺菌劑菌液的 pH
        4.3.2 加入不同比例兩種復(fù)合殺菌劑菌液的 Eh
        4.3.3 加入不同比例兩種復(fù)合殺菌劑菌液的 Fe~(2+)氧化率
        4.3.4 卡松/SDS、玉潔純/SDS 抑菌效果的比較
        4.3.5 復(fù)合殺菌劑對(duì) A. f 菌的抑菌穩(wěn)定性
        4.3.6 復(fù)合殺菌劑與單一殺菌劑殺菌效果對(duì)比
        4.3.7 復(fù)合殺菌劑與單一殺菌劑作用后 A. f 菌氧化 Fe~(2+)性能的測(cè)定
        4.3.8 復(fù)合殺菌劑與單一殺菌劑抑菌圈的比較
    4.4 本章小結(jié)
5 兩種復(fù)合殺菌劑卡松/SDS 和玉潔純/SDS 的抑菌機(jī)理
    5.1 實(shí)驗(yàn)材料
        5.1.1 待測(cè)菌液
        5.1.2 培養(yǎng)基
        5.1.3 主要溶液配制
        5.1.4 殺菌劑
        5.1.5 實(shí)驗(yàn)儀器
    5.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.2.1 復(fù)合殺菌劑對(duì) A. f 菌抑菌活力的測(cè)定
        5.2.2 復(fù)合殺菌劑對(duì) A. f 菌細(xì)胞完整性的影響
        5.2.3 A. f 菌細(xì)胞結(jié)構(gòu)的觀察
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 抑菌活力
        5.3.2 細(xì)胞完整性
        5.3.3 細(xì)胞結(jié)構(gòu)的變化
    5.4 本章小結(jié)
6 緩釋復(fù)合殺菌劑的條件研究
    6.1 實(shí)驗(yàn)材料
        6.1.1 實(shí)驗(yàn)菌種
        6.1.2 殺菌劑
        6.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        6.1.4 實(shí)驗(yàn)器具和儀器
    6.2 實(shí)驗(yàn)方法
        6.2.1 保水劑對(duì)復(fù)合殺菌劑的吸、持、釋性能
        6.2.2 保水劑對(duì)復(fù)合殺菌劑殺菌性能的影響
        6.2.3 緩釋復(fù)合殺菌劑對(duì) A. f 菌的最小抑菌量
        6.2.4 不同條件對(duì)緩釋復(fù)合殺菌劑殺菌效果的影響
        6.2.5 緩釋復(fù)合殺菌劑緩釋性能的考察
        6.2.6 緩釋復(fù)合殺菌劑在煤矸石中的應(yīng)用
    6.3 結(jié)果與討論
        6.3.1 保水劑對(duì)復(fù)合殺菌劑的吸、持、釋性能
        6.3.2 保水劑對(duì)復(fù)合殺菌劑殺菌性能的影響
        6.3.3 緩釋復(fù)合殺菌劑對(duì) A.f 菌的最小抑菌量
        6.3.4 不同條件對(duì)緩釋復(fù)合殺菌劑殺菌效果的影響
        6.3.5 緩釋復(fù)合殺菌劑緩釋性能的測(cè)定
        6.3.6 緩釋復(fù)合殺菌劑在煤矸石中的應(yīng)用
    6.4 本章小結(jié)
7 結(jié)論與展望
    7.1 主要研究成果與結(jié)論
    7.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    7.3 存在的問(wèn)題
    7.4 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
在學(xué)期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文及參加科研工作情況



本文編號(hào)：3567213