成本低廉、高效、環(huán)境友好的微生物修復(fù)技術(shù),是治理多環(huán)芳烴-重金屬復(fù)合污染的良策。從溫州市平陽縣水頭鎮(zhèn)分離得到兩株芘-鉻(Ⅵ)共脫毒菌株F1和Z6,鑒定為Raoultella sp.和Serratia sp.,并對菌株的共脫毒性能進(jìn)行研究。結(jié)果表明:F1菌株和Z6菌株的最適脫毒條件:溫度30℃、pH 9.0,F1菌株接種量30%,Z6菌株接種量50%,兩菌株在共脫毒時鉻(Ⅵ)對芘降解有抑制,但芘對鉻(Ⅵ)還原有輕微促進(jìn)作用。Z6菌株的共脫毒能力優(yōu)于F1菌株,優(yōu)化條件后Z6菌株將20 mg/L鉻(Ⅵ)完全還原,同時將50 mg/L芘降解率達(dá)60%,具有更大的應(yīng)用潛力。
【部分圖文】：

將復(fù)篩得到的6株菌株提取其基因組DNA，成功提取的基因組DNA結(jié)果見圖1．以此基因組DNA作為模板進(jìn)行16SrRNA基因的PCR擴增，可以看到擴增出16SrRNA基因結(jié)果，見圖2．圖中，M為DNA Marker，泳道1-6依次為菌株B,1,5,8,6,10．將PCR產(chǎn)物送交公司測序后用NCBI網(wǎng)站的Blast軟件進(jìn)行比對，結(jié)果表明這6株菌分屬于Bacillus sp.（.芽孢桿菌屬）、Raoultella sp.（.拉烏爾菌屬）和Serratia sp.（.沙雷氏菌屬）共3個屬，根據(jù)復(fù)篩中效率檢測，它們的綜合性能最優(yōu)者為6號，而1號效率雖不夠高，但屬于Raoultella sp.（.拉烏爾菌屬），比較少見此類菌具有降解芘或還原鉻（Ⅵ）能力，故選取1號和6號菌進(jìn)一步研究，并將其命名為Raoultella sp.F1和Serratia sp.Z6，同時將其提交到GenBank上，接收號為KY006166和KY006167.圖2 六株菌的16Sr RNA基因

在20℃、30℃和40℃下進(jìn)行了菌株共脫毒效率的檢測，結(jié)果見圖3．由圖3可知，溫度對兩株菌還原20 mg/L鉻（Ⅵ）的能力有促進(jìn)作用，并且Z6菌株優(yōu)于F1菌株；30℃和40℃顯著大于20℃，而30和40℃比較接近，其中40℃略大于30℃．在30℃時兩株菌株的芘降解能力是最好的，并且Z6菌株優(yōu)于F1菌株．溫度對兩株菌降解芘的影響規(guī)律是：30℃最優(yōu)，20℃最低，推測是20℃不適于菌體生長，菌體生長受到較大影響進(jìn)而共脫毒能力減弱．溫度是微生物生長的重要條件，低溫可導(dǎo)致細(xì)胞膜凝固，引起物質(zhì)運送困難，而高溫則可使蛋白質(zhì)變性，故溫度成了影響微生物生長繁殖和生理代謝活動的最重要因素之一[15]．鑒于兩株菌降解芘時30℃最好，而還原鉻（Ⅵ）時最適溫度是40℃比30℃略高，綜合二者，采用30℃作為其最佳溫度．2.3 pH對菌株共脫毒的影響

pH設(shè)置6.0-10.0檢測兩株菌共脫毒效率，2 d后取樣測量鉻（Ⅵ）還原率，7 d后取樣測量芘降解率，結(jié)果見圖4．從圖4可以看出，Z6和F1都在pH 9.0時鉻（Ⅵ）還原率達(dá)到最好，其中Z6菌可以將20 mg/L鉻（Ⅵ）完全還原．兩菌降解芘的pH影響不同，它們都在pH:7.0-10.0的芘降解率比pH 6.0較高，Z6在pH 7.0最優(yōu)達(dá)到56.8%，而F1在pH 9.0的時候降芘率達(dá)到最大值60.6%．因此F1在pH 9.0降芘效果最好，Z6在pH 7.0降芘效果最好．絕大多數(shù)微生物的生長pH都在5.0-9.0之間[14]，細(xì)菌更適于在中性偏堿環(huán)境中生長，其代謝活動也傾向于在中性偏堿環(huán)境中有利，F(xiàn)1在pH 9.0時降芘和還原鉻（Ⅵ）效率都最優(yōu)，而Z6還原鉻（Ⅵ）最適pH也為9.0，但降芘最適pH為7.0，不同菌株可能降解芘和還原鉻（Ⅵ）的相關(guān)酶不同，所需求的最適pH值也會不同，很少數(shù)菌會在極堿性條件下如pH低于11.5下還原鉻（Ⅵ）[16]．綜合pH對兩菌降芘率和降鉻（Ⅵ）率的影響結(jié)果，后續(xù)實驗統(tǒng)一采用pH 9.0.2.4 接種量對菌株共脫毒的影響
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