【摘要】： 唑螨酯是日本在二十世紀九十年年代開發(fā)的一種新型吡唑類殺螨劑,由于其具有高選擇性殺螨作用,在世界各國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的使用越來越廣泛。對唑螨酯的代謝和殘留研究表明唑螨酯在土壤和水體中具有較長的殘留期,而且與其作用機理相似的農(nóng)藥均顯示對魚類高毒,并且與人類帕金森綜合征有密切關(guān)系。因此唑螨酯對水體的污染以及對水生生物的毒性和人類健康的影響也越來越受到關(guān)注。本文采用了牙鲆活體及其鰓細胞系FG-9307作為體內(nèi)外檢測體系,系統(tǒng)研究了唑螨酯對于牙鲆這種海洋經(jīng)濟魚類代表物種的急性毒性作用,并初步探討了牙鲆及其鰓細胞系這兩種體內(nèi)外檢測體系對污染物毒性檢測的相關(guān)性。 本研究首先探討了唑螨酯對FG細胞系的體外急性毒性作用。研究發(fā)現(xiàn):(1)三種檢測方法測定的唑螨酯對FG細胞的48h IC50介于0.48-0.51μmol/L之間,96h IC50介于0.89-1.25μmol/L之間,說明唑螨酯對于體外培養(yǎng)魚類細胞系具有毒性作用;同時也說明牙鲆鰓細胞系對于唑螨酯毒性作用比較敏感;(2)唑螨酯在0.1-30μmol/L濃度范圍內(nèi)對FG細胞生長具有明顯抑制作用,并引起細胞形態(tài)明顯改變;(3)唑螨酯影響了細胞抗氧化系統(tǒng)活性以及超氧陰離子的含量。經(jīng)唑螨酯處理后的FG細胞,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)和過氧化物酶(CAT)的活性均受到顯著抑制,而超氧陰離子的含量明顯升高。 其次,本研究通過對牙鲆幼體LC50測定、肝臟抗氧化酶系統(tǒng)活性檢測以及組織化學染色等研究方法,探討了唑螨酯對牙鲆體內(nèi)急性毒性作用。研究發(fā)現(xiàn):(1)唑螨酯對牙鲆幼體48h和96h LC50分別為28.77 nmol/ L和11.74 nmol/ L;(2)唑螨酯影響了牙鲆肝臟抗氧化系統(tǒng)活性。肝臟抗氧化酶SOD、CAT和GPX活性在唑螨酯作用下出現(xiàn)明顯的升高,隨后又降低至低于正常的水平;(3)唑螨酯還能夠造成牙鲆鰓、肝臟等組織器官的急性組織結(jié)構(gòu)損傷,影響組織器官正常功能。 最后,本研究對本實驗室近年采用FG細胞系及玫瑰無須靶和牙鲆作為體內(nèi)外毒性檢測體系開展的環(huán)境污染物毒性研究數(shù)據(jù)資料進行了匯總分析,初步探討了FG細胞系體外毒性與體內(nèi)毒性檢測結(jié)果之間的相關(guān)性。分析結(jié)果表明:體外毒性檢測體系對環(huán)境污染物毒性檢測敏感度低于體內(nèi)檢測體系,目前研究資料尚不能對牙鲆體內(nèi)外檢測體系的相關(guān)性關(guān)系做出明確判斷,需要更多數(shù)據(jù)資料支持。 總之,本研究表明唑螨酯對于牙鲆顯示出高毒性。牙鲆及其鰓細胞系在近年來被越來越多應(yīng)用于環(huán)境污染物毒性檢測中,在本實驗室開展的研究中也顯示出對于環(huán)境污染物具有較高的敏感性,說明牙鲆及其鰓細胞系能夠很好地反映環(huán)境污染物對海洋魚類的體內(nèi)外毒性效應(yīng)。這對牙鲆及鰓細胞系作為環(huán)境污染物對海洋魚類污染檢測的模式動物提供了很好的理論依據(jù)。
【學位授予單位】：中國海洋大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2008
【分類號】：X174
【圖文】：

22圖 1-2 唑螨酯化學名，化學結(jié)構(gòu)及代謝產(chǎn)物Fig 1-2 Chemical name, Chemical structure and metabolites offenpyroximate.

所有實驗都重復 3 次。數(shù)據(jù)分析采用 SPSS13 版本統(tǒng)計軟件。所有way ANOVA 評價，顯著性差異設(shè)定 p＜0.05。果 唑螨酯對 FG 細胞的 48h-IC50 值和 96h-IC50 值如圖 2-1 和 2-2 所示，MTT、中性紅和蛋白質(zhì)含量分析測定的唑螨48h-IC50值分別為0.89、0.95和1.25 μmol/L，96h-IC50值分別為0.49μmol/ L。在最低濃度組 0.1μmol/L 濃度下唑螨酯就開始表的毒性作用，而且這種毒性作用呈現(xiàn)明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系。隨著唑，細胞生長抑制程度也增大。從圖中還可以看出，所選用的 MTT、質(zhì)含量分析三種檢測體系測得的細胞毒性作用趨勢基本相同。

2-2 暴露于不同濃度唑螨酯 96 小時 FG 細胞生長抑制曲線。唑螨酯對 FG毒性作用采用中性紅、MTT 和蛋白質(zhì)含量三種測試終點進行測試。數(shù)值均正常對照組百分比±標準差表示。Fig. 2-2 Cell proliferation inhibition curves of FG cells exposed to differenoncentrations of fenpyroximate for 96 h.In vitro cytotoxicity of fenpyroximate ells was determined by NR assay, MTT assay, and cell protein assay. The indivdata points are expressed as the arithmetic mean percentage of control±SE.2 細胞形態(tài)變化如圖 2-3 所示，F(xiàn)G 細胞在正常的生長狀態(tài)下細胞形態(tài)呈上皮樣，細胞大，細胞內(nèi)顆粒少，沒有空泡，胞膜清晰。經(jīng)不同濃度唑螨酯處理 48 小胞均呈現(xiàn)不同程度皺縮，細胞間隙增大。隨唑螨酯濃度增加，鏡下觀察到皺縮程度逐漸嚴重，崩解細胞數(shù)量明顯增加，大量細胞脫離培養(yǎng)瓶底變圓壁細胞數(shù)量明顯減少，到 30uM 濃度下貼壁細胞數(shù)量已經(jīng)非常少。

【引證文獻】

相關(guān)博士學位論文 前1條

1 于貞;三種海洋濾食動物對有機磷農(nóng)藥的反應(yīng)及降解[D];大連理工大學;2011年

相關(guān)碩士學位論文 前1條

1 耿德玉;構(gòu)建轉(zhuǎn)基因魚類細胞以快速檢測環(huán)境污染物的遺傳毒性[D];中國海洋大學;2012年

本文編號：2754992