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四溴雙酚A對櫛孔扇貝毒性效應(yīng)與污染監(jiān)測技術(shù)的研究

發(fā)布時間:2020-07-03 19:12
【摘要】:四溴雙酚A (tetrabisphenol A)是目前世界上產(chǎn)量和使用量最大的一種溴系阻燃劑。這種阻燃劑可以被作為反應(yīng)型阻燃劑(超過90%)添加到印刷電路板和作為添加型阻燃劑混合入塑料合成物中。由于其廣泛使用,并能夠從產(chǎn)品中釋放到環(huán)境中,目前在全球范圍內(nèi)的環(huán)境介質(zhì)中普遍存在。TBBPA由于與甲狀腺激素結(jié)構(gòu)類似,是一種潛在的內(nèi)分泌干擾物。此外,它還被證實(shí)具有神經(jīng)毒性、內(nèi)分泌毒性、腎毒性和肝毒性等。本文根據(jù)我國近海環(huán)境TBBPA污染狀況,以櫛孔扇貝(Chlamys farreri)為研究對象,研究了櫛孔扇貝在TBBPA脅迫下的多種毒性效應(yīng),構(gòu)建了TBBPA在櫛孔扇貝體內(nèi)生理毒代-毒效動力學(xué)模型,建立了快速檢測TBBPA濃度的酶聯(lián)免疫方法,對青島近海海域進(jìn)行了為期一年的生物監(jiān)測工作,為TBBPA對海洋生物的毒性機(jī)制研究提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù),并為海洋TBBPA的污染監(jiān)測(檢測)提供了技術(shù)支持。1櫛孔扇貝在TBBPA脅迫下毒性效應(yīng)的研究本章首先研究了TBBPA對櫛孔扇貝的餌料藻,小新月菱形藻(Nitzschia closterium f. minutissima)的毒性效應(yīng),結(jié)果顯示TBBPA能快速地在小新月菱形藻細(xì)胞內(nèi)累積,并能顯著誘導(dǎo)SOD、GST酶的活力和GSH含量的增加。其次,通過食物和海水+食物兩種暴露方式用TBBPA對櫛孔扇貝染毒,結(jié)果發(fā)現(xiàn)海水途徑是櫛孔扇貝吸收TBBPA的主要方式(占總吸收量的92%左右),單純食物途徑TBBPA染毒也能夠?qū)笨咨蓉惤M織的解毒代謝指標(biāo)產(chǎn)生顯著影響。然后,設(shè)置TBBPA暴露濃度為0.2、0.4和0.8 mg/L,通過海水+食物途徑對櫛孔扇貝進(jìn)行染毒10d,緊接著進(jìn)行10d的消除實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示櫛孔扇貝能夠快速吸收和代謝TBBPA,TBBPA脅迫能夠激活機(jī)體的抗氧化防御體系,并能顯著誘導(dǎo)GST、 UGT和SULT等二相代謝酶的活力,高濃度的TBBPA導(dǎo)致的脂質(zhì)和DNA損傷在短時間內(nèi)難以修復(fù)。2櫛孔扇貝在TBBPA脅迫下的數(shù)字基因表達(dá)譜分析本研究使用Illumina的數(shù)字基因表達(dá)譜技術(shù)(DGE),考察了在TBBPA脅迫下櫛孔扇貝消化盲囊組織的轉(zhuǎn)錄響應(yīng)。結(jié)果總共分別發(fā)現(xiàn)了173條顯著上調(diào)的基因和266條顯著下調(diào)的基因;贕O分類系統(tǒng)和KEGG數(shù)據(jù)庫的功能分析發(fā)現(xiàn)TBBPA顯著改變了與應(yīng)激響應(yīng)、解毒代謝、抗氧化和免疫功能有關(guān)基因的表達(dá),并且發(fā)現(xiàn)了TBBPA干擾甲狀腺內(nèi)分泌系統(tǒng)的證據(jù)。熒光定量實(shí)驗(yàn)用來確認(rèn)DGE分析結(jié)果的準(zhǔn)確與可靠。這些結(jié)果為研究TBBPA對雙殼貝類的分子毒性機(jī)制提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。3 TBBPA污染監(jiān)測(檢測)技術(shù)的研究基于相關(guān)性分析的結(jié)果,選取酶活力和損傷效應(yīng)的生物標(biāo)志物SOD、GST、GSH和LPO等作為毒效指標(biāo)與TBBPA在櫛孔扇貝組織里的動態(tài)分布結(jié)合起來,構(gòu)建生理毒代-毒效動力學(xué)模型,能夠?qū)笨咨蓉愺w內(nèi)TBBPA的吸收、分布、代謝、排出與生物組織的標(biāo)志物響應(yīng)偶聯(lián)起來。將不具有抗原活力的小分子有機(jī)污染物TBBPA與牛血清蛋白(BSA)偶聯(lián)制成人工抗原免疫大鼠,獲得免疫抗原。優(yōu)化反應(yīng)條件,建立了用于快速檢測海洋環(huán)境TBBPA含量的間接酶聯(lián)免疫方法。此方法檢測速度快、靈敏度高,交叉干擾小。該方法的線性檢測范圍為0.1-100 ng/mL。4基于櫛孔扇貝青島近海污染生物監(jiān)測研究2014年選擇青島近海區(qū)域靈山衛(wèi)(S1)、海泊河口(S2)和沙子口(S3)三個站點(diǎn)進(jìn)行污染調(diào)查,結(jié)果發(fā)現(xiàn)PAHs和重金屬類:海泊河口沙子口靈山衛(wèi);TBBPA:海泊河口靈山衛(wèi)沙子口。主成分分析發(fā)現(xiàn)MT含量變化對于Cu和Cr污染濃度具有指向性,EROD活力變化與As、Mn、PAHs和TBBPA污染水平有關(guān)。計(jì)算綜合生物標(biāo)志物響應(yīng)指數(shù)(IBR)后發(fā)現(xiàn)三站點(diǎn)遭受的環(huán)境壓力順序?yàn)椋汉2春涌谏匙涌陟`山衛(wèi),與三個站點(diǎn)的總體污染情況相符。
【學(xué)位授予單位】:中國海洋大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:X171.5;S917.4

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本文編號:2740057

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