本文選題：熒光標記 + 熒光計數(shù)��； 參考：《中國環(huán)境科學(xué)》2017年01期

【摘要】：采用熒光染料DAPI(4',6-Diamidino-2-Phenylindole)對外源微生物Bacillus subtilis 38(B38)的DNA分子進行標記,利用熒光示蹤技術(shù)對外源微生物的生長繁殖進行有效監(jiān)測.通過篩選DAPI工作液的使用濃度與菌懸液的稀釋比例,得出采用0.1μg/mL濃度的DAPI對稀釋10~6倍的菌懸液進行染色,熒光信號強度適宜,菌體分散度良好,可實現(xiàn)準確計數(shù).采用上述染色條件,對60d內(nèi)土壤B38菌體數(shù)量的變化進行階段性監(jiān)測.結(jié)果發(fā)現(xiàn),接種后菌體濃度顯著增加,平衡后菌體濃度達到(1.05±0.01)×10~(10)cells/mL,與初期施加量相比,增長量達到3個數(shù)量級.以上結(jié)果表明,采用DAPI染料對外源微生物進行熒光示蹤計數(shù),為監(jiān)測外源微生物的生長繁殖狀態(tài)提供了一種簡便、有效的方法.
[Abstract]:The DNA molecule of exogenous microorganism Bacillus subtilis 38 (B38) was labeled with the fluorescent dye DAPI4 (6-Diamidino-2-Phenylindole), and the growth and reproduction of exogenous microorganism was effectively monitored by fluorescence tracer technique.By screening the dilution ratio between the concentration of DAPI working solution and the suspension of bacteria, it is concluded that the DAPI of 0.1 渭 g/mL concentration can be used to dye the bacterial suspension of 10 ~ 6 times dilution, the fluorescence signal intensity is suitable, the bacterial dispersion is good, and the accurate count can be realized.The changes of the number of B38 bacteria in soil within 60 days were monitored by using the above dyeing conditions.The results showed that the bacterial concentration increased significantly after inoculation and reached 1.05 鹵0.01 脳 10 ~ (10) cells / mL after inoculation, which was three orders of magnitude higher than that of initial application.The results show that the fluorescent tracer counting of exogenous microorganisms with DAPI dyes provides a simple and effective method for monitoring the growth and reproduction of exogenous microbes.
【作者單位】： 南開大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院;
【基金】：天津市應(yīng)用基礎(chǔ)與前沿技術(shù)研究計劃(青年項目)(15JCQNJC15200) 國家科技支撐計劃項目(2014BAC23B0205)
【分類號】：X53;X172

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本文編號：1738273