大鼠視神經(jīng)挫傷后GAP-43表達與PRVEP檢測的時序性研究

發(fā)布時間：2017-09-11 22:46

本文關鍵詞：大鼠視神經(jīng)挫傷后GAP-43表達與PRVEP檢測的時序性研究

【摘要】：【研究背景】眼外傷導致的視功能下降是法醫(yī)學鑒定時最常見的臨床表現(xiàn)之一，其嚴重程度與被鑒定人的損傷程度和傷殘等級直接相關。由于此類案件一般都涉及到經(jīng)濟賠償問題，因此，大部分被鑒定人在檢測過程中往往出現(xiàn)不同程度的掩飾、夸大癥狀或偽裝視功能損害。視覺誘發(fā)電位（Visual evoked potential，VEP）是目前臨床上應用較為廣泛的一種評估視功能的檢測方法，它從電生理水平上客觀反映了眼外傷后視功能的狀況。但其檢測結果易受受試者精神狀態(tài)、注視度等多因素的影響，從而限制了其在臨床上的廣泛應用。生長相關蛋白（Growthassociated protein, GAP-43）作為神經(jīng)再生的特異性標志物，其在傷后的時序性表達可在一定程度上反映傷后視功能恢復的情況，能從蛋白水平闡述視功能變化的分子機制。傷后不同時間點視功能可能不同，目前尚缺乏眼外傷后VEP檢測與GAP-43表達的聯(lián)合研究，深入研究兩者之間的聯(lián)系對于全面評價視功能有著重要的意義。【目的】從電生理及蛋白分子水平探討視神經(jīng)損傷后視功能變化規(guī)律，為準確評價視神經(jīng)損傷及傷后視功能提供有力的依據(jù)。【材料與方法】SD成年大鼠42只，分為對照組（正常對照組和假手術組）及損傷組，損傷組再按不同時間分為5組(1d、3d、7d、14d、28d)，每組6只，同期行模式翻轉視覺誘發(fā)電位（Patternreversal evoked potential, PRVEP）檢測傷眼及正常眼視功能狀況，而后灌流固定，眼球取材切片，光鏡觀察視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(Retinal ganglion cells, RGCs)的改變，免疫組化方法檢測RGCs中GAP-43的表達水平。對GAP-43表達的時間規(guī)律進行分析，并與傷后模式翻轉視覺誘發(fā)電位的檢查結果進行比較，，分析其與PRVEP的相關性。【結果】（1）正常對照組大鼠P100潛伏期73.532.11ms，波幅13.342.88uv，假手術組與其相比無顯著性差異（P0.05）。傷后1d組P100潛伏期明顯延長（106.377.33ms），延長率44.7%，較對照組有顯著性差異（P0.05），此后逐漸延長，14d組潛伏期最長(120.6713.11ms)，延長率64.1%。此后逐漸縮短，28d組變化已不明顯（74.073.59ms），與對照組相比無顯著性差異（P0.05）。傷后1d組P100波幅較正常組明顯降低（4.79uv），下降64.1%。3d組波幅降至谷底（4.09 1.23uv），下降69.3%。此后逐漸上升，28d組基本趨于穩(wěn)定（13.064.49uv），與對照組相比無顯著性差異（P0.05）。（2）正常對照組及假手術組大鼠視網(wǎng)膜僅有少量GAP-43表達（平均光密度值0.241±0.068），主要位于內(nèi)叢狀層。傷后1d組，GAP-43表達不明顯(平均光密度值0.275±0.068)，3d組在RGCs中表達明顯增加（平均光密度值0.304±0.110，較正常組增加26.1%），7d組在RGCs中達到峰值（平均光密度值0.389±0.182，較正常組增加61.8%），隨后開始下降，28d組表達已不明顯（平均光密度值0.269±0.099），同對照組相比無顯著性差異（P0.05）。（3）損傷組GAP-43的平均光密度值與P100潛伏期和波幅間存在相關關系，但不同組間有較大差別。GAP-43平均光密度值與P100潛伏期相關系數(shù)分別為：r1d=0.183，r3d=0.356，r7d=-0.524，r14d=0.498，r28d=0.233，相關均有統(tǒng)計學意義（P0.05）。GAP-43平均光密度值與P100波幅的相關系數(shù)分別為r1d=-0.123， r3d=-0.243，r7d=0.424，r14d=0.408，r28d=0.134，相關均有統(tǒng)計學意義（P0.05）。【結論】PRVEP潛伏期在傷后1天開始出現(xiàn)顯著變化，在傷后14天開始恢復，在傷后28天時已基本穩(wěn)定，其變化規(guī)律對于法醫(yī)學正確運用VEP評價視功能、估計預后及掌握鑒定時機有明確的指導意義,也為臨床治療及神經(jīng)保護研究提供了理論依據(jù)。GAP-43在正常大鼠的視網(wǎng)膜中僅有少量表達，損傷早期GAP-43表達的上調(diào)是視功能恢復的重要基礎。在傷后不同時間大鼠視網(wǎng)膜出現(xiàn)特異性的GAP-43表達上調(diào)和下調(diào)，并且與PRVEP的變化具有明顯的時間關聯(lián)性，能從分子水平客觀反映視神經(jīng)挫傷后視功能恢復的狀況。
【關鍵詞】：視神經(jīng)損傷 生長相關蛋白 視覺誘發(fā)電位 視網(wǎng)膜 視功能
【學位授予單位】：華中科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：D919.4
【目錄】：