【摘要】： 目的:用PCR基因分型技術(shù)分析研究昆明地區(qū)常住人口Rh陰性血型的D基因多態(tài)性,研究和探討這些等位基因的分子基礎(chǔ)及其Rh陰性血型的D基因在中國人中的群體頻率,發(fā)現(xiàn)更多的D變異基因;建立和完善本地區(qū)Rh血型的PCRRHD基因檢測方法,為產(chǎn)前診斷和臨床輸血提供RHD基因檢測信息。 方法:選擇昆明地區(qū)的健康人群為研究對象,首先用血清學(xué)方法篩選出46例Rh陰性血型樣本,再通過吸收放散試驗從這46例Rh陰性血型樣本中檢測出Del表型個體。用經(jīng)典的苯酚-氯仿-異戊醇方法從樣本中提取基因組DNA作為PCR反應(yīng)的模板,通過PCR-SSP技術(shù)檢測D基因多態(tài)性,首先采用外顯子—序列特異性引物擴增和檢測所有樣本的D基因外顯子組成情況,檢測結(jié)果為D基因部分存在者再采用內(nèi)含子—序列特異性引物進行PCR擴增,聚丙烯酰胺凝膠電泳,硝酸銀染色顯帶分析結(jié)果,最后通過DNA測序技術(shù)檢測RHD假基因(RHDψ)和雜交RHD-CE-D基因。 結(jié)果:本研究在46例Rh陰性血型樣本中,D基因完整缺失者29例(63%),為真正Rh陰性;D基因完整存在者12例(26.1%),存在全部外顯子,即Del表型;D基因部分存在者5例(10.9%),其中2例僅存在D基因的第10外顯子,1例存在D基因的第7、9、10外顯子,1例存在D基因的第4、6外顯子,1例僅存在D基因的第6外顯子。DNA測序結(jié)果顯示,2例僅存在D基因的第10外顯子的樣本均為RHD-CE(3-9)-D雜合基因,1例存在D基因的第4、6外顯子為RHD-CE(2-3,5,7-9)-D雜合基因,是新發(fā)現(xiàn)的變異等位基因。本實驗在所研究的46例Rh陰性血型樣本中未檢測到RHD假基因(RHDψ)。 結(jié)論: 1.昆明地區(qū)常住人群存在高頻率的Del表型和RHD-CE(3-9)-D雜合基因。 2.在昆明人群發(fā)現(xiàn)一種新型D變異等位基因即RHD-CE(2-3,5,7-9)-D雜合基因。
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圖片說明： 圖2.真實Rh陰性(D基因外顯子全部缺失，內(nèi)參照正確)(2)Del表型本實驗檢測到Del表型12例，占全部樣本26.1%，與吸收放散試驗結(jié)果一致。在抗人球蛋白試驗中，這12例樣本全部是Rh陰性，但PCR檢測其D基因，7個外顯子全部存在。(見圖3一圖6)多伙bP147bP
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圖片說明： 圖2.真實Rh陰性(D基因外顯子全部缺失，內(nèi)參照正確)Del表型本實驗檢測到Del表型12例，占全部樣本26.1%，與吸收放散試驗結(jié)果一致。在抗人球蛋白試驗中，這12例樣本全部是Rh陰性，但PCR檢測其D基因，7個外顯子全部存在。(見圖3一圖6)
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：D919

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陳強,陳娟,李政,劉忠,毛偉,徐雅琴,武大林,郭一鳴,蘭炯采;中國部分地區(qū)RhD(-)漢族人RHD基因結(jié)構(gòu)分析[J];中國輸血雜志;2000年02期

2 徐群,張世訓(xùn),張建業(yè),司桂玲,宋永紅,王玫,李京,王濰,聶向民;中國漢族群體RhD(-)個體D基因和CE基因外顯子多態(tài)性研究[J];中國輸血雜志;2001年01期

3 毛偉,吳強,王芳,李華;19名RhD(-)經(jīng)產(chǎn)婦的RHD基因多態(tài)性分析[J];中國輸血雜志;2001年02期

4 徐群,李京,王玫,張世訓(xùn);用PCR-SSP技術(shù)檢測弱D型RHD基因1例[J];中國輸血雜志;2001年03期

5 于衛(wèi)建,陳玫,胡榮花,蘭炯采,陳強,武大林,劉孟黎,孟慶寶,郭一鳴,毛偉,劉忠,胡宗煌;遼南地區(qū)39名RhD(-)漢族無關(guān)供血者中RH基因檢測[J];中國輸血雜志;2001年04期

6 馮雙利,盧志芬,劉則紅;33名RhD(-)無關(guān)獻血者中Del的檢測分析[J];中國輸血雜志;2001年05期

7 邵超鵬;RHD研究進展和中國人RHD研究現(xiàn)狀分析[J];中國輸血雜志;2003年05期

8 周華友,蘭炯采;人類Rh血型系統(tǒng)研究進展[J];中國輸血雜志;2004年03期

9 孫國棟;景海珍;熊文;張彥平;尹志柱;牛小利;邵超鵬;李艷鳳;段現(xiàn)民;趙有良;牛海江;;在中國人群中首次發(fā)現(xiàn)1例Rh血型弱D12型[J];中國輸血雜志;2006年01期

10 陳強,蘭炯采,郭一鳴;人類Rh血型系統(tǒng)的分子生物學(xué)研究進展[J];中國輸血雜志;1998年04期

本文編號：2513631