本文選題：嗎啡 + SKNSH細(xì)胞株��； 參考：《第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)》2005年06期

【摘要】：目的: 研究以cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白 (cAMPresponseelementbindingprotein,CREB)為靶點(diǎn)的CREB轉(zhuǎn)錄因子誘騙 (CRE transcriptionfactordecoyoligodeoxynucleotide、CRE decoyODN)對(duì)慢性嗎啡作用SK N SH細(xì)胞CREB相關(guān)指標(biāo)的影響.方法: 體外合成含cAMP反應(yīng)元件 (cAMPresponseelement,CRE)的單鏈寡核苷酸,以DOTAP為轉(zhuǎn)移介質(zhì),將CRE decoyODN與慢性嗎啡作用和納絡(luò)酮催促戒斷的SK N SH細(xì)胞共同孵育,采用非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳及放射自顯影檢測(cè)CRE decoyODN細(xì)胞摻入;EMSA檢測(cè)CRE decoyODN與轉(zhuǎn)錄因子CREB結(jié)合的特異性以及其對(duì)慢性嗎啡作用SK N SH細(xì)胞CREB的DNA結(jié)合活性影響;WesternBlot檢測(cè)CREB 1及磷酸化CREB 1蛋白表達(dá).結(jié)果: 以DOT AP為介質(zhì),將CRE decoyODN成功導(dǎo)入SK N SH細(xì)胞;慢性嗎啡作用及納絡(luò)酮催促戒斷使SK N SH細(xì)胞CREB的DNA結(jié)合活性和磷酸化CREB 1 蛋白表達(dá)明顯增高 (P值均0 01),CREB 1蛋白無明顯改變,CRE decoyODN可抑制CREB的DNA結(jié)合活性和磷酸化CREB 1蛋白表達(dá)的改變(P0 01),對(duì)CREB 1蛋白表達(dá)無明顯影響.結(jié)論: CRE de coyODN可特異抑制慢性嗎啡作用及納絡(luò)酮催促戒斷SK N SH細(xì)胞CREB的DNA結(jié)合活性和磷酸化CREB 1蛋白表達(dá)的增高,對(duì)CREB 1蛋白表達(dá)無明顯影響.
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of CREB transcription factor decoy (CRE transcriptiontordecoygodeoxynucleotidedeoxynucleotidec ODN) targeting camp response element binding protein (cAMP) response element binding protein (CREB) on CREB related indexes of SK N SH cells induced by chronic morphine. Methods: single strand oligonucleotides containing camp response element were synthesized in vitro. CRE decoy ODN was incubated with SK N SH cells induced by chronic morphine and naloxone induced withdrawal with DOTAP as transfer medium. The specificity of CRE decoy ODN binding to transcription factor CREB and the effect of CRE decoy ODN on the DNA binding activity of CREB in SK N SH cells induced by chronic morphine were detected by non-denatured polyacrylamide gel electrophoresis and autoradiography. The expression of CREB 1 and phosphorylated CREB 1 protein were detected. Results: CRE decoy ODN was successfully transfected into SK N SH cells in DOT AP medium. Chronic morphine and naloxone-precipitated withdrawal significantly increased CREB DNA-binding activity and phosphorylated CREB1 protein expression in SK N SH cells. No significant changes in CREB1 protein were observed in SK N SH cells. No change in CRE decoy ODN could inhibit CREB DNA binding activity and phosphoric acid expression in SK N SH cells. The change of CREB 1 protein expression was not significantly affected by P0 01 protein expression. Conclusion: CRE de coyODN can specifically inhibit the effect of chronic morphine and the increase of CREB DNA binding activity and phosphorylated CREB 1 protein expression in SK N SH cells induced by naloxone, but has no significant effect on CREB 1 protein expression.
【作者單位】： 河北醫(yī)科大學(xué)法醫(yī)學(xué)教研室 河北醫(yī)科大學(xué)法醫(yī)學(xué)教研室 河北醫(yī)科大學(xué)法醫(yī)學(xué)教研室 河北醫(yī)科大學(xué)法醫(yī)學(xué)教研室 河北醫(yī)科大學(xué)法醫(yī)學(xué)教研室 河北醫(yī)科大學(xué)法醫(yī)學(xué)教研室 河北醫(yī)科大學(xué)法醫(yī)學(xué)教研室 河北醫(yī)科大學(xué)法醫(yī)學(xué)教研室 河北醫(yī)科大學(xué)法醫(yī)學(xué)教研室
【分類號(hào)】：D919

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2039356