本文關(guān)鍵詞：一重和三重腦震蕩鼠BB、BW和FS行為學(xué)變化及腦組織GFAP和MBP變化研究　出處：《昆明醫(yī)科大學(xué)》2013年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：第一部分三重腦震蕩大鼠BB、BW和FS行為學(xué)變化研究 [目的]：建立三重腦震蕩(multiple cerebral concussion,MCC)大鼠模型,觀察腦震蕩后平衡木實(shí)驗(yàn)(beam balance test,BB)、橫桿跑動(dòng)實(shí)驗(yàn)(beam walking test,BW)及強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)(forced swimming test,FS)行為學(xué)變化,評(píng)估大鼠傷后靜態(tài)和動(dòng)態(tài)平衡運(yùn)動(dòng)、學(xué)習(xí)、記憶功能的恢復(fù)情況及精神活動(dòng)的抑郁樣狀況。[方法]：(1)動(dòng)物分組：成年健康SD大鼠20只,雌雄各半,體重260±20g,隨機(jī)分為MCC72h橫桿跑動(dòng)組和MCC72h強(qiáng)迫游泳組,每組各10只,雌雄各半。(2)應(yīng)用金屬單擺打擊裝置,每隔72h打擊一次PCC,共打擊3次以復(fù)制MCC72h模型。(3)應(yīng)用BB和BW實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)MCC72h大鼠傷后16天內(nèi),靜態(tài)和動(dòng)態(tài)平衡功能、運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)功能和運(yùn)動(dòng)學(xué)習(xí)記憶功能的變化并與本課題組先前PCC組和MCC24h組結(jié)果進(jìn)行比較;應(yīng)用FS實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)MCC72h大鼠傷后第3、7、15、30天精神抑郁樣狀況,并與本課題組先前PCC組和MCC24h組結(jié)果進(jìn)行比較。[結(jié)果]：(1)BB評(píng)分結(jié)果：PCC組和MCC72h組大鼠傷后在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間均能保持相對(duì)靜態(tài)平衡,結(jié)果均為(60.00±0.00s); MCC24h大鼠傷后9天內(nèi)出現(xiàn)不同程度的靜態(tài)平衡功能的損害。(2)BW評(píng)分結(jié)果：PCC組與MCC72h組大鼠傷后第一天即恢復(fù)至正常值,即整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間分值均為5分,所有受試大鼠在噪音的刺激下都能順利通過(guò)跑桿上所有障礙并進(jìn)入暗盒內(nèi)；MCC24h大鼠傷后第1-2天BW評(píng)分降低,與PCC組和MCC72h組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P0.05,之后恢復(fù)至5分。(3)BW步入潛伏期結(jié)果：MCC72h組與正常組相比,傷后第1-3天均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05；PCC組與MCC72h組傷后大鼠STL在整個(gè)觀測(cè)時(shí)間點(diǎn)STL差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05；MCC24h組與MCC72h組在傷后第3-6天,STL差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05。(4)BW失足頻次結(jié)果：MCC72h大鼠傷后失足頻次增加,第3天達(dá)到高峰,之后逐步減少,第8天又出現(xiàn)一個(gè)小高峰。(5)FS中抑郁樣行為頻次：MCC72h傷后第3、15、30天與正常組、PCC組和MCC24h組相比,C行為頻次最多。[結(jié)論]：(1)PCC、MCC24h與MCC72h大鼠傷后靜態(tài)平衡能力未見損傷改變。(2) PCC、MCC72h大鼠的動(dòng)態(tài)運(yùn)動(dòng)平衡、運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)功能、學(xué)習(xí)和記憶功能在末次打擊后4天內(nèi)出現(xiàn)短時(shí)異常改變,而MCC24h大鼠的相應(yīng)功能則在傷后第8天均表現(xiàn)出明顯損傷。(3) PCC、MCC24h和MCC72h三種不同損傷類型傷后平衡運(yùn)動(dòng)功能損傷的嚴(yán)重程度為：MCC24hMCC72hPCC正常對(duì)照組；抑郁樣行為頻次：MCC72hMCC24hPCC正常對(duì)照組。 第二部分一重和三重腦震蕩大鼠腦組織GFAP和MBP動(dòng)態(tài)變化研究 [目的]：建立一次性腦震蕩(pure cerebral concussion,PCC)和三重腦震蕩(multiple cerebral concussion, MCC)大鼠模型,其中三重腦震蕩的打擊間隔時(shí)間分別為24h和72h,觀察并分別比較上述不同損傷組之間膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)和髓鞘堿性蛋白(nyelin basic protein, MBP)的變化以及PCC和MCC傷后各天數(shù)組內(nèi)GFAP與MBP的變化,以進(jìn)一步了解大鼠不同腦震蕩后神經(jīng)組織學(xué)產(chǎn)生的變化。 [方法]：(1)動(dòng)物分組：成年健康SD大鼠96只,雌雄各半,體重260±20g,隨機(jī)分為正常組、PCC模型組、MCC24h模型組、MCC72h模型組,各模型組再隨機(jī)分為Id、4d、8d、16d和24d5個(gè)觀測(cè)點(diǎn)。(2)應(yīng)用金屬單擺打擊裝置復(fù)制PCC大鼠模型30只、MCC24h模型30只、MCC72h模型30只。(3)用抗GFAP和抗MBP抗體進(jìn)行免疫組化S-P法染色,檢測(cè)大鼠中隔冠狀斷面、海馬區(qū)冠狀斷面和腦干失狀斷面的不同腦區(qū)的GFAP和MBP表達(dá),采用圖像分析系統(tǒng)對(duì)上述腦區(qū)的GFAP和MBP陽(yáng)性反應(yīng)物分別進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和光密度值測(cè)定分析。 [結(jié)果]：(1)GFAP陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)傷后變化結(jié)果①GFAP在PCC、MCC24h、MCC72h中隔冠狀斷面、海馬區(qū)冠狀斷面和腦干失狀斷面的各腦區(qū)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)于傷后第1天就逐漸增多,于傷后第8天達(dá)到高峰,與正常對(duì)照組相比,陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；②MCC72h傷后第1天GFAP陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)即進(jìn)入高表達(dá)量,多于MCC24h、PCC和止常對(duì)照組；③MCC24h傷后第8天GFAP計(jì)數(shù)表達(dá)最多,高于其他各組,且持續(xù)高表達(dá)時(shí)間最長(zhǎng)；④PCC傷后第1天GFAP表達(dá)即增加,與正常對(duì)照組比較差異具有統(tǒng)計(jì)意義(p0.05),增加和減少的幅度均最小。(2)MBP陽(yáng)性表達(dá)物光密度值結(jié)果①M(fèi)BP在PCC、MCC24h、MCC72h中隔冠狀斷面、海馬區(qū)冠狀斷面和腦干失狀斷面的各腦區(qū)陽(yáng)性反應(yīng)物光密度值于傷后第1天就逐漸降低,于傷后第4天達(dá)到最低谷,與對(duì)照組相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；②MCC72h傷后第1天即進(jìn)入低表達(dá),與PCC陽(yáng)性反應(yīng)物光密度值相近,但第4天進(jìn)入低谷表達(dá)時(shí)低于PCC組,兩組差異比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；③MCC24h傷后陽(yáng)性反應(yīng)物光密度值在早期即發(fā)生低表達(dá),至第4天達(dá)到最低谷,與其他各組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,且低表達(dá)持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)；④PCC傷后第1天陽(yáng)性反應(yīng)物光密度值即進(jìn)入低表達(dá)狀態(tài),至第4天達(dá)到最低谷,之后陽(yáng)性反應(yīng)物光密度值迅速上升接近正常水平。 [結(jié)論]：(1)采用金屬單擺式機(jī)械打擊裝置能夠成功建立MCC72h大鼠模型。(2) PCC、MCC24h和MCC72h末次打擊傷后,GFAP陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)表達(dá)出現(xiàn)不同程度的增加,均以傷后8d天表達(dá)最多,提示星形膠質(zhì)細(xì)胞的損傷嚴(yán)重程度：MCC24hMCC72hPCC正常組。(3)PCC、MCC24h和MCC72h傷后,MBP陽(yáng)性反應(yīng)物光密度值表達(dá)出現(xiàn)不同程度的下降,均以傷后4天表達(dá)最低,提示少突膠質(zhì)細(xì)胞MBP損傷嚴(yán)重程度：MCC24hMCC72hPCC正常組。(4)在PCC、MCC24h和MCC72h三種損傷類型中MCC24h損傷程度最重,持續(xù)時(shí)間最長(zhǎng),損傷累積效應(yīng)最明顯。(5)各損傷類型組大鼠傷后,各斷面不同腦區(qū)傷后GFAP陽(yáng)性細(xì)胞和MBP陽(yáng)性反應(yīng)物表達(dá)空間分布特征具有彌漫性和沖擊與對(duì)沖加重的特點(diǎn)。
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：D919.1

【參考文獻(xiàn)】

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1 劉和錄;韓杰輝;竇宇紅;許瑞娜;宋同均;;腦外傷患者髓鞘堿性蛋白和腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子檢測(cè)的價(jià)值[J];國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2011年13期

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本文編號(hào)：1320128