本文關(guān)鍵詞：膜表面活性劑泊洛沙姆188抗腦外傷后神經(jīng)細胞死亡作用及機制研究

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【摘要】：目的：細胞質(zhì)膜完整性的破壞是導(dǎo)致腦外傷后繼發(fā)性損傷的主要原因之一,我們的前期研究證實腦外傷可引起神經(jīng)細胞凋亡及自噬激活等一些繼發(fā)性事件。本研究主要以質(zhì)膜完整性作為切入點,探索質(zhì)膜修復(fù)劑泊洛沙姆188(P188)能否對腦外傷引起的細胞凋亡及自噬等產(chǎn)生影響,進而起到神經(jīng)保護作用,并對其保護機制進行探討。 方法：利用改良的自由落體裝置建立小鼠定量腦外傷(traumatic brain injury, TBI)模型。腦外傷后P188通過鼠尾靜脈立即給藥,并按傷后時間不同分別于處死前1h用腹腔注射法將碘化丙啶(propidium iodide, PI)注入各組小鼠腹腔內(nèi),采用體視學(xué)顯微鏡觀察損傷細胞并計數(shù)各組損傷中心區(qū)及周邊區(qū)陽性細胞數(shù),研究P188對TBI引起的神經(jīng)細胞質(zhì)膜完整性破壞的影響；為了探討PI陽性細胞能否代表腦外傷引起的細胞丟失,用組織缺損體積(lesion volume, LV)評估TBI后腦組織缺損情況；應(yīng)用行為學(xué)試驗(Motor Test和Morris水迷宮試驗)方法評估TBI后各組動物的運動和學(xué)習(xí)記憶功能,以探討腦外傷引起的細胞丟失能否導(dǎo)致功能性損害。同時還檢測了激活型的Caspase-3及凋亡相關(guān)蛋白表達水平,并對凋亡機制進行了深入的探討；并檢測了P188對腦外傷后細胞自噬信號途徑的影響,并對其作用機制進行了探討。 結(jié)果：(1)腦外傷后傷側(cè)腦組織中均發(fā)現(xiàn)PI陽性細胞,其數(shù)量在24小時至48小時時間點達到高峰；與生理鹽水組比較,P188組PI陽性細胞數(shù)量均在腦外傷后24小時和48小時時間點顯著降低(P0.05)。(2)與生理鹽水組比較,P188能明顯減少腦的缺損體積；與假手術(shù)組比較,小鼠腦外傷后尋找水迷宮平臺有更長的潛伏期,提示腦外傷能引起學(xué)習(xí)和記憶功能障礙；與生理鹽水組比較,P188處理后能明顯加快其運動功能的恢復(fù)；P188處理組在腦外傷后表現(xiàn)出更短的潛伏期(P0.05)。(3)腦外傷引起的caspase-3的激活、細胞色素c釋放、Bcl-2蛋白表達水平下調(diào)以及Bax、P53蛋白表達水平表達上調(diào),P188處理后能逆轉(zhuǎn)這種改變；與鹽水組比較,P188處理后使caspase-8和caspase-9的蛋白水平下調(diào)。(4)與鹽水組比較,P188組腦外傷引起的的LC-3Ⅱ蛋白表達水平明顯增高,P62明顯降低,hVps34與Beclin-1蛋白水平大量增加。 結(jié)論：(1)P188處理后能減少腦外傷引起的細胞死亡和腦組織缺損,減輕運動及學(xué)習(xí)記憶功能障礙。(2)腦外傷后可引起神經(jīng)細胞凋亡,P188通過抑制caspase-8和caspase-9以及細胞色素C的水平顯著抑制TBI引起的神經(jīng)細胞凋亡。(3)腦外傷后可激活自噬,P188通過調(diào)節(jié)Beclin-1/Bcl-2比值、促進hVps34表達來進一步促進自噬激活。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：D919.1

【參考文獻】

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本文編號：1189661