發(fā)布時間：2017-10-18 04:11

  本文關(guān)鍵詞：PPARγ、NF-κB及COX-2在大鼠肝損傷模型中的表達(dá)及法醫(yī)學(xué)意義

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【摘要】：目的： 研究大鼠肝臟損傷后不同時間過氧化物酶體增殖物激活受體y(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)、細(xì)胞核因子-KB(nuclear factor kappa B, NF-κB)及環(huán)氧合酶2(cyclooxygenase2, COX-2)在肝臟組織中的表達(dá)變化,分析其時序性變化與損傷時間的關(guān)系,探討其是否可以作為法醫(yī)學(xué)工作實踐中推斷早期肝臟損傷時間的敏感指標(biāo)。 方法： 健康成年雄性清潔級Sprague-Dawley大鼠54只,體重250±30g(由山西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供),隨機分為對照組(n=6)、生前損傷組(n=42)及死后損傷組(n=6)。大鼠稱重后,10%水合氯醛以3ml/kg的劑量腹腔注射麻醉,采用自由落體撞擊法復(fù)制出大鼠肝臟鈍性撞擊傷模型,并于損傷后0.5h、1h、2h、4h、8h、12h、24h機械性處死,提取肝臟組織迅速放入4%多聚甲醛中固定16h。死后損傷組為死后1h制模,均取相同部位肝臟,同上述方法處理。用蘇木素-伊紅染色技術(shù)(hematoxylin and eosin, HE)觀察肝臟組織在損傷后的病理組織學(xué)改變,Super Vision兩步法檢測損傷后不同時間PPARγ、NF-κB及COX-2的表達(dá)。利用MIAS-2000醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)測定免疫組化未復(fù)染切片的陽性單位,并將各損傷組與對照組及死后損傷組進(jìn)行比較,用SPSS16.0對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果： (1)HE染色結(jié)果：正常對照組可見肝小葉結(jié)構(gòu)清晰,肝細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常,排列整齊,未見炎性細(xì)胞浸潤。損傷組可見隨著損傷時間的延長,肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂,肝竇擴張充血并出現(xiàn)逐漸加重的肝細(xì)胞水腫變性壞死,肝細(xì)胞核深染固縮,大量炎性細(xì)胞浸潤。 (2)對照組肝細(xì)胞僅有低水平NF-κB陽性表達(dá),隨損傷時間的推移肝細(xì)胞染色增強,于8h時棕黃色反應(yīng)物聚集成簇,陽性單位達(dá)峰值。12-24h仍可見大量粗大棕黃色顆粒沉積,陽性表達(dá)有所下降但仍維持在一個相對穩(wěn)定的高水平。 COX-2的陽性表達(dá)主要定位在Kupffer細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、膽管內(nèi)皮細(xì)胞和肝細(xì)胞,黃色或棕黃色顆粒彌漫于細(xì)胞漿。COX-2在正常肝組織僅有少量表達(dá),陽性表達(dá)于損傷后依次升高,2h達(dá)高峰,后持續(xù)回落。 PPARγ主要表達(dá)在肝細(xì)胞,集中于中央靜脈及匯管區(qū)。對照組即可見陽性表達(dá),傷后陽性表達(dá)出現(xiàn)小幅度升高,4h達(dá)高峰,隨后顯著下調(diào),降至對照組水平以下。 經(jīng)統(tǒng)計學(xué)方差分析：各損傷組與對照組及與相鄰上組的陽性單位比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),死后損傷組與對照組無明顯表達(dá)差異(P0.05)。 結(jié)論： (1)檢測PPARγ、NF-κB及COX-2蛋白的表達(dá)可鑒別肝臟生前傷和死后傷； (2)大鼠肝損傷后24h內(nèi)PPARγ、NF-κB與COX-2的表達(dá)呈現(xiàn)規(guī)律性,可望作為肝臟早期損傷時間推斷的參考指標(biāo)。
【關(guān)鍵詞】：法醫(yī)學(xué) 損傷時間 PPARγ NF-κB COX-2
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：D919.4
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-11
• 實驗材料和方法11-16
• 結(jié)果16-19
• 附圖19-22
• 附表22-24
• 討論24-30
• 結(jié)論30-31
• 參考文獻(xiàn)31-35
• 綜述35-43
• 參考文獻(xiàn)40-43
• 個人簡介43-44
• 致謝44

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號：1052862