以香樟根際土壤為試材,采用PVK平板檢測法、亞歷山大平板檢測法、CAS平板檢測法、JNFb培養(yǎng)基檢測法、Salkowski比色法,分別研究了從香樟根際土中隨機挑取的22株細菌的解磷、解鉀、產(chǎn)鐵載體、固氮、產(chǎn)吲哚-3-乙酸（IAA）能力,采用16S rDNA對產(chǎn)鐵載體和產(chǎn)IAA能力較強的菌株進行了分子鑒定,以期為探討香樟速生、耐貧瘠等機制,同時也為香樟及其它植物研制微生物菌肥提供一定的參考依據(jù)。結(jié)果表明:挑取的22株細菌中,有7株具有解磷能力,8株具有固氮能力,11株能產(chǎn)鐵載體,16株能產(chǎn)IAA。對初步分離的具有產(chǎn)鐵載體和產(chǎn)IAA的菌株進行進一步的定量測定發(fā)現(xiàn),菌株XZ3和XZ22產(chǎn)生的鐵載體活性單位明顯高于其它菌株,分別為78.4%和74.6%。XZ11和XZ13產(chǎn)IAA的能力最強分別為46.82、46.19μg·mL^-1。經(jīng)16S rDNA分子鑒定,XZ3和XZ22分別隸屬短小芽孢桿菌（Lysinibacillus sp.）和芽孢桿菌（Bacillus sp.）,XZ11和XZ13分別隸屬假單胞菌（Pseudomonas sp.）和短小芽孢桿菌（Lysiniba... 

【文章來源】：北方園藝. 2019,(04)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

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圖１菌株ＸＺ３的ＣＡＳ檢測Ｆｉｇ．１Ｓｉｄｅｒｏｐｈｏｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｓｏｆ

７株在白色瓷板經(jīng)Ｓａｌｋｏｗｓｋｉ比色顏色為深紅色的菌株進行進一步的定量測定。從測定結(jié)果可以看出，這７株菌株產(chǎn)ＩＡＡ的能力依次為ＸＺ１３＞ＸＺ１１＞ＸＺ８＞ＸＺ１９＞ＸＺ１２＞ＸＺ１７＞ＸＺ２１。其中菌株ＸＺ１３和ＸＺ１１產(chǎn)ＩＡＡ的能力顯著高于其它菌株，分別為４６．８２、４６．１９μｇ·ｍＬ－１。菌株ＸＺ１７和ＸＺ２１產(chǎn)ＩＡＡ的能力明顯低于其它菌株，分別僅為１５．８８、１２．５５μｇ·ｍＬ－１。圖２菌株產(chǎn)ＩＡＡ的定量測定Ｆｉｇ．２ＱｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＩＡＡｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙｓｔｒａｉｎｓ２．４菌株的分類地位選取經(jīng)過定量檢測分泌鐵載體能力最強的２株菌株ＸＺ３和ＸＺ２２，以及分泌ＩＡＡ能力最強的２株菌株ＸＺ１３和ＸＺ１１進行分子鑒定。分別提取這４株菌株的總ＤＮＡ后，對其進行１６ＳｒＤＮＡＰＣＲ擴增，將擴增產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳后得到了約１５００ｂｐ的目的條帶。將目的片段割膠回收測序后的ＤＮＡ序列與ＮＣＢＩ數(shù)據(jù)庫Ｂｌａｓｔ進行同源性比較，并采用ＭＥＧＡ４．０．１軟件構(gòu)建系統(tǒng)進化樹。由圖３可以看出，ＸＺ３和ＸＺ１３與短小芽孢桿菌（Ｌｙｓｉｎｉｂａｃｉｌｌｕｓｓｐ．）親緣關(guān)系較近，而菌株ＸＺ１１與假單胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．）親緣關(guān)系較近，菌株ＸＺ２２與芽孢桿菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｐ．）親緣關(guān)系較近（圖４）。因此，初步確定ＸＺ３和ＸＺ１

圖３菌株基于１６ＳｒＤＮＡ的系統(tǒng)進化樹Ｆｉｇ．３Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｔｒｅｅｂａｓｅｄｏｎｔｈｅ１６ＳｒＤＮＡｇｅｎｅｓｅｑｕｅｎｃｅｏｆｓｔｒａｉｎｓ進植物生長、抵抗病蟲害的侵染和介導植物忍受重金屬、養(yǎng)分虧缺、多環(huán)芳烴、干旱等非生物脅迫方面具有重要影響［７－８］。如具有解磷功能的細菌能將土壤中難溶性的磷酸鹽轉(zhuǎn)變成可溶性的磷酸鹽從而促進植物對磷的吸收。能分泌鐵載體的微生物，一方面能很好的螯合土壤中三價的鐵離子，促進植物對鐵的吸收，另一方面促生菌通過螯合鐵元素，使得病原菌競爭不到鐵元素，從而抑制病原微生物的生長，減少植物病害的發(fā)生［１９］。在介導植物修復重金屬污染土壤方面，產(chǎn)鐵載體微生物也發(fā)揮了重要作用，微生物分泌的鐵載體還能與其它金屬形成可溶性的金屬－鐵載體螯合物，增加土壤中重金屬的溶解性或者導致植物根部氧自由基的減少，從而提高植物對重金屬的富集能力和耐受能力［１８，２０］。固氮微生物則能將大氣中的氮氣還原為植物能利用的氨，為植物提供合成蛋白質(zhì)所必需的氮素營養(yǎng)。分泌ＩＡＡ的細菌，則能刺激植物根系的生長，香樟能形成龐大而廣泛的根系［２１］，這可能與其根際存有較多的能分泌ＩＡＡ的細菌有關(guān)。因此綜合該研究的結(jié)果和前人研究的成果，課題組推測香樟根際促生菌的存在可能與香樟生長迅速、耐貧瘠、抗病蟲害及對多環(huán)芳烴和重金屬的富集方面有一定的聯(lián)系。但具體是那些促生菌在起作用，以及這些促生菌是如何其作用的，還有待于進一步的研究。參考文獻［１］ＺＨＯＵＹ，ＹＡＮＷ．Ｃｏｎｓ

【參考文獻】：
碩士論文
[1]鐵載體高產(chǎn)菌株的ARTP選育及其鐵載體產(chǎn)量提高機理的初步分析[D]. 孫萌.江南大學 2017



本文編號：3563492