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北海紅樹林根際土壤放線菌及一株微小桿菌的分離與鑒定

發(fā)布時間:2020-05-24 05:04
【摘要】:紅樹林所處的環(huán)境具有地域特異性。環(huán)境的特殊性為微生物多樣性和生物活性的研究提供了優(yōu)良平臺。 本論文以北海紅樹林根際土壤樣品為研究對象,從兩個方面進行研究。其一,通過對樣品處理方法的探索,采用分散與差速離心的方法進行前處理,同時結合使用不同類型的放線菌分離培養(yǎng)基,如ISP系列培養(yǎng)基、脯氨酸培養(yǎng)基、M系列培養(yǎng)基、改良高氏一號和二號培養(yǎng)基等18種培養(yǎng)基,共分離得到42株放線菌,其中尤以高氏培養(yǎng)基、ISP系列的培養(yǎng)基分離的菌種為多;對不同樣品處理方法進行評價,結果表明,DDC處理法分離得到的菌株最多;對分離得到的放線菌進行生物學形態(tài)觀察;對其中一株可能有淀粉酶活性的放線菌,采用分子生物學手段提取基因組DNA進行16S rDNA序列分析,并進行生理生化、肽聚糖型、磷酸類脂及全細胞糖和氨基酸分析,結果表明:這株菌屬于鏈霉菌屬;有淀粉酶活性;無纖維素酶活性;其肽聚糖型為羥基乙;;通過薄層層析,顯示為PⅣ型磷酸類脂;全細胞糖分析為C類糖型;全細胞氨基酸分析為I型胞壁。其二,分離放線菌的過程中,于ISP5培養(yǎng)基上偶然分離出一株微小桿菌屬菌,生物信息學結果表明該菌株16S rDNA序列與親緣關系較近的Exiguobacteriumarabatum strain APT13a (登錄號KC519397.1)菌株比對后,相似性為96%,構建該菌株的系統(tǒng)進化樹,對這株菌進行生理生化、肽聚糖型、磷酸類脂及全細胞糖和氨基酸分析,結果表明:這一菌株無淀粉酶活性;無纖維素酶活性;其肽聚糖型為羥基乙;;通過薄層層析,,顯示為PⅤ型磷酸類脂;全細胞糖分析為D類糖型;全細胞氨基酸分析結果有待進一步確定。本研究為紅樹林地區(qū)微生物資源的研究提供了實驗依據(jù)。
【圖文】:

菌落形態(tài),培養(yǎng)基,菌落形態(tài),放線菌


D M6 培養(yǎng)基 E M10 培養(yǎng)基 F M13 培養(yǎng)基J ISP4 培養(yǎng)基 K 改良高氏一號 L 無機鹽瓊脂G M2 培養(yǎng)基 H M4 培養(yǎng)基 I M5 培養(yǎng)基

菌落形態(tài),菌落形態(tài),菌落,放線菌


圖 2.3 顯微鏡下觀察的菌落形態(tài)Fig 2.3 Microscope photo of typical strain結果顯示放線菌菌落一般為圓形、表面平滑或者中部有褶皺,干燥堅實難挑取,菌落顏色以白色、淡黃色、灰色為主,鏡檢顯示菌落周圍呈輻射狀。革蘭氏染色鏡檢結果顯示為紫色,屬于革蘭氏陽性菌。2.4.3 DDC 法與傳統(tǒng)法在分離紅樹林土壤放線菌中的差異性實驗同時對其他樣品預處理方法包括傳統(tǒng)稀釋法和干熱處理法與 DDC 法進行對比,對比結果如圖所示:
【學位授予單位】:廣西民族大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:S714.3

【參考文獻】

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