全球每年約產(chǎn)生數(shù)百萬噸的羽毛廢棄物,大多數(shù)沒有被合理回收利用,不僅產(chǎn)生環(huán)境污染,同時對羽毛這一富含高蛋白的生物資源造成極大的浪費。因此,廢棄羽毛的回收利用越來越受到人們的關(guān)注。本文從微生物的角度出發(fā),探索利用生物法降解廢棄羽毛,將其轉(zhuǎn)化為高附加值的飼料蛋白資源,同時探索相關(guān)菌株高效降解羽毛的具體機制。本文首先進行了角蛋白酶的異源表達,成功獲得三株產(chǎn)角蛋白酶的枯草芽孢桿菌工程菌株,通過發(fā)酵對比其中B.subtilis WB600-p MA5q-ker K的角蛋白酶活最高,達到982.26U/m L,但隨后進行的實驗表明單一的角蛋白酶并不能降解天然羽毛,需要還原劑和角蛋白酶共同作用。在此基礎(chǔ)上,課題組通過大量的分離篩選從家禽羽毛廢棄物長期堆積的土壤中獲得一株新的羽毛降解微生物,該菌能夠在36小時內(nèi)完全降解雞羽毛(包括羽毛軸)。對該菌株從形態(tài)學(xué),生理生化水平以及分子水平對該菌株進行了表征和鑒定,最終將篩選的高效降解羽毛降解菌株命名為Streptomyces sp.SCUT-3。隨后對SCUT-3降解羽毛產(chǎn)物在動物、植物和微生物中進行了初步應(yīng)用試驗,羽毛降解產(chǎn)物能夠部分替代魚粉作為動物飼料蛋白...

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2-1角蛋白酶酶活測定酪氨酸標準曲線（660nm）

第二章角蛋白酶在B.subtilisWB600中的克隆與表達23出分離膠時停止；（4）染色：用刮膠板將玻璃板撬開取出膠塊，切去濃縮膠并用蒸餾水洗滌，隨后加入考馬斯亮藍R-250染色液染色約30min；（5）脫色：將考馬斯亮藍R-250染色液回收并用蒸餾水洗滌3遍，加入脫色液后稍微....

圖2-2三種角蛋白酶目的基因電泳結(jié)果

華南理工大學(xué)碩士學(xué)位論文2440℃水浴中預(yù)熱2min后，混勻后于40℃中水浴反應(yīng)20min。反應(yīng)結(jié)束后，加入200μL0.4M的TCA。隨后，于12000rpm離心5min后，棄沉淀，并取100μL上清液加入到1.5mL的離心管中，加入100μL福林酚試劑和500μL0.4M碳酸....

圖2-3轉(zhuǎn)化子菌落PCR電泳結(jié)果

第二章角蛋白酶在B.subtilisWB600中的克隆與表達25圖2-3轉(zhuǎn)化子菌落PCR電泳結(jié)果。1和2為pMA5q空載；3-5為pMA5q-kerA；6-8為pMA5q-kerC；9-11為pMA5q-kerKFigure2-3PCRelectrophoresisresults....

圖2-4聚丙烯酰胺凝膠電泳結(jié)果

第二章角蛋白酶在B.subtilisWB600中的克隆與表達25圖2-3轉(zhuǎn)化子菌落PCR電泳結(jié)果。1和2為pMA5q空載；3-5為pMA5q-kerA；6-8為pMA5q-kerC；9-11為pMA5q-kerKFigure2-3PCRelectrophoresisresults....

本文編號：3973890