蛋白質(zhì)量控制(Protein Quality Control,以下簡稱蛋白質(zhì)控)系統(tǒng)負(fù)責(zé)保證生物體內(nèi)蛋白質(zhì)的穩(wěn)定并降解錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì),以此維持著生物體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)。軸突再生是軸突損傷后神經(jīng)系統(tǒng)自我修復(fù)的重要一環(huán),在神經(jīng)再生的過程中神經(jīng)元需要恢復(fù)細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài),并進(jìn)行大量的蛋白質(zhì)合成和降解,這些過程需要蛋白質(zhì)控系統(tǒng)的高度參與。目前蛋白質(zhì)控系統(tǒng)在神經(jīng)再生中的作用以及機(jī)制尚不明確,因此研究這一關(guān)鍵問題不僅有助于我們了解神經(jīng)再生的分子機(jī)制,也能夠?yàn)樯窠?jīng)損傷的治療提供理論基礎(chǔ)。在這里,我們利用激光損傷秀麗隱桿線蟲神經(jīng)元的模型,來測試不同蛋白質(zhì)控分子對軸突再生的作用。在系統(tǒng)性地篩選線蟲基因突變品系之后,我們發(fā)現(xiàn)了蛋白質(zhì)控分子之一的E3泛素連接酶UFD-2抑制線蟲PLM感覺神經(jīng)元和DD2運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元軸突的再生。與此同時(shí),我們發(fā)現(xiàn)腫瘤抑制因子p53的線蟲同源蛋白CEP-1對線蟲軸突再生也有重要作用。在PLM和DD2神經(jīng)元軸突損傷后,UFD-2缺失的動(dòng)物軸突再生顯著增加,而CEP-1缺失的動(dòng)物軸突再生顯著減少。組織特異性基因拯救實(shí)驗(yàn)顯示在神經(jīng)元或者其它部分非神經(jīng)元組織中表達(dá)CEP-1或者UFD-2可逆轉(zhuǎn)...

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1線蟲模型：線蟲包含消化系統(tǒng)（綠色）、生殖系統(tǒng)（黃色）、肌肉（藍(lán)色）和神經(jīng)系統(tǒng)（紅色和粉紅色）

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文緒論32004年，科學(xué)家運(yùn)用飛秒脈沖激光，成功實(shí)現(xiàn)了對線蟲體內(nèi)單軸突的定點(diǎn)損傷，并且在損傷后，觀察到了有功能性的軸突再生[6]。脈沖式激光利用其平均能量低而瞬時(shí)能量高的特點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)了定點(diǎn)損傷單個(gè)軸突，同時(shí)不影響周圍組織的目標(biāo)。除此之外，線蟲unc-70基因突變帶....

圖1.2UFD2蛋白物種進(jìn)化分析

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文緒論6圖1.2UFD2蛋白物種進(jìn)化分析。[15]A.各種物種UFD2a與UFD2b蛋白堿基比較。B.UFD2蛋白進(jìn)化樹。目前已知UFD2的重要分子功能是與細(xì)胞中蛋白質(zhì)控的核心分子p97（也被稱為CDC48或VCP）結(jié)合，幫助p97識(shí)別并泛素化蛋白底物[16,1....

圖2.1PLM神經(jīng)元損傷模型:對Pmec-4::GFP標(biāo)記的PLM神經(jīng)元軸突進(jìn)行激光損傷，并在損傷24hr后，進(jìn)行再生成像

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文材料與方法3210倍物鏡下找到線蟲后將其移至視野中央并切換至100倍鏡，微調(diào)焦距，將線蟲尾部（PLM損傷）或身體中部（DD2損傷）移至視野中央。iii.通過軟件進(jìn)行激光損傷。開啟相機(jī)與激光，通過電腦屏幕找到相應(yīng)軸突，在距PLM神經(jīng)元胞體40μm或DD2軸突中間....

圖2.2DD2神經(jīng)元損傷模型:對Punc-25::GFP標(biāo)記的DD2神經(jīng)元軸突進(jìn)行激光損傷，并在損傷24hr后，進(jìn)行再生成像

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文材料與方法33圖2.2DD2神經(jīng)元損傷模型:對Punc-25::GFP標(biāo)記的DD2神經(jīng)元軸突進(jìn)行激光損傷，并在損傷24hr后，進(jìn)行再生成像。A.用Punc-47::GFP標(biāo)記的線蟲熒光表達(dá)圖譜。B.DD2神經(jīng)元損傷模式圖。C.DD神經(jīng)元損傷24hr后再生情況分....

本文編號：3945765