目的:比較貼壁法和密度梯度離心法分離提取經(jīng)血源性間充質(zhì)干細胞;探討經(jīng)血源性間充質(zhì)干細胞對子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞的作用,為其臨床應(yīng)用提供依據(jù)。方法:1.使用無菌月經(jīng)杯收集年齡<35歲的健康女性第2-4天的月經(jīng)血,通過Ficoll密度梯度離心法和貼壁法提取Men SCs,并采用流式細胞術(shù)鑒定。2.通過添加生長因子和17-β-戊酸雌二醇構(gòu)建Men SCs向子宮內(nèi)膜細胞方向分化的微環(huán)境,誘導Men SCs的轉(zhuǎn)化,通過免疫熒光法檢測ESCs特異性標記蛋白Vimentin和上皮細胞特異性標記蛋白CK,評估Men SCs的轉(zhuǎn)化能力。3.選取行宮腔鏡刮宮的患者,收集子宮內(nèi)膜組織,通過二次網(wǎng)篩法分離ESCs并培養(yǎng),采用免疫熒光法進行鑒定。4.間接共培養(yǎng)Men SCs與ESCs,通過CCK-8法評估Men SCs對正常ESCs的增殖作用,Western-blot檢測共培養(yǎng)后ESCs胞質(zhì)內(nèi)的Vimentin和VEGF的表達量,觀察Men SCs培養(yǎng)基培養(yǎng)后對這兩種蛋白的表達影響。結(jié)果:1.Ficoll密度梯度離心法所提取出的細胞表面標志物的陽性表達率分別為83.88%、98.69%、98.78%、99.80...

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學位級別】：碩士

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英文縮寫
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述 薄型子宮內(nèi)膜形成的原因及治療現(xiàn)狀
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致謝
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