科研中經(jīng)常需要在模式生物的特定部位或特定類型細胞內(nèi)敲入、敲除、敲低或過表達特定的基因以實現(xiàn)對實驗自變量的精確調(diào)控,這時就需要利用各種轉(zhuǎn)基因小鼠。環(huán)化重組酶(cyclization recombinase, Cre)可在無任何輔助因子的作用下與不同形式的loxP (locus X over P1) DNA序列直接結(jié)合并相互作用,從而可在特定靶點進行特定基因的敲入、敲除等,具有作用原理簡單、空間特異性高、重組效率高等優(yōu)點而被廣泛應用。在Cre-loxP系統(tǒng)基礎上衍生出的CreERT2系統(tǒng)(Cre與雌激素受體配體結(jié)合域的融合蛋白突變體)以及四環(huán)素(tetracycline, Tet)-on/off系統(tǒng)可在空間特異性的基礎上補充時間特異性,從而可以使目的基因在特定時間、特定空間發(fā)生重組。這種時間、空間的雙重特異性在減少對實驗動物影響的基礎上對于如恐懼記憶、印跡細胞等方面的研究不可或缺,具有廣闊的應用前景。

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【文章目錄】：
1 Cre-lox P系統(tǒng)的組成元件
    1.1 Cre
    1.2 Lox P序列
    1.3 Cre與lox P序列的相互作用
2 Cre-lox P系統(tǒng)在小鼠體內(nèi)的構建
    2.1 Cre、lox P純合小鼠雜交
        2.1.1構建lox P純合小鼠
        2.1.2 構建Cre純合小鼠
        2.1.3 雜交
    2.2 Cre小鼠與工具病毒
    2.3 Lox P小鼠與工具病毒
    2.4 Cre與lox P工具病毒
3 Cre-lox P系統(tǒng)的衍生系統(tǒng)
    3.1 Cre ERT2系統(tǒng)
    3.2 Tet-on/off系統(tǒng)
        3.2.1 Tet-off系統(tǒng)(無Tet、Dox時目的基因表達)
        3.2.2 Tet-on系統(tǒng)(有Tet、Dox時目的基因表達)
4 應用舉例
    4.1 神經(jīng)精神藥物研究
    4.2 睡眠覺醒
    4.3 社會行為
    4.4 恐懼記憶
5 總結(jié)與展望



本文編號：3770274