核酸染色劑對DNA在瓊脂糖凝膠電泳中遷移速度的影響
發(fā)布時間:2023-02-08 21:06
核酸染色應用在許多DNA檢測相關的技術領域,然而染色劑結合DNA會造成電泳遲滯。為研究溴化乙錠(ethidium bromide,EB)和GelRed這2種核酸染色劑對DNA在瓊脂糖凝膠電泳中遷移速度的影響,分別用這2種染色劑采用前、后染色的方法對DNA進行染色,以瓊脂糖凝膠電泳作為檢測方法,凝膠成像系統(tǒng)拍照觀察,用Reptation理論分析數據。研究結果表明EB和GelRed染色均使DNA遷移發(fā)生了滯后,但EB對于目的基因片段大小的判讀未受電泳滯后的影響,而GelRed對目的基因判讀略有影響。然而,與EB相比,GelRed具有熒光效果強、安全、環(huán)保等諸多優(yōu)點?傊,需要精確鑒定目的基因片段大小可以選擇后染色或EB前染色,對于鑒定目的基因片段大小要求不高且需要熒光效果好、環(huán)保的染色劑可以選擇GelRed。
【文章頁數】:4 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 質粒與菌株。
1.1.2 主要試劑。
1.2 方法
1.2.1 前染色1%凝膠配制。
1.2.2 后染色。
1.2.3 電泳。
1.2.4 目的基因的擴增純化。
2 結果與分析
2.1 EB與GelRed染色特點
2.2 EB與GelRed均使DNA產生遷移滯后
2.3 EB與GelRed染色劑使DNA遷移滯后對目的基因判讀的影響
2.4 用Reptation理論解釋EB和GelRed結合DNA對目的基因判讀的影響
3 討論
本文編號:3738372
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1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 質粒與菌株。
1.1.2 主要試劑。
1.2 方法
1.2.1 前染色1%凝膠配制。
1.2.2 后染色。
1.2.3 電泳。
1.2.4 目的基因的擴增純化。
2 結果與分析
2.1 EB與GelRed染色特點
2.2 EB與GelRed均使DNA產生遷移滯后
2.3 EB與GelRed染色劑使DNA遷移滯后對目的基因判讀的影響
2.4 用Reptation理論解釋EB和GelRed結合DNA對目的基因判讀的影響
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