動(dòng)粒蛋白CENP-C/H/K復(fù)合物的體外重組與互作機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2022-02-17 14:05
有絲分裂過程中,染色體的準(zhǔn)確分離需要諸多亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的協(xié)同運(yùn)作。位于著絲粒兩側(cè)的動(dòng)粒復(fù)合物是其重要的參與者之一。動(dòng)粒蛋白的缺失或異?蓪(dǎo)致紡錘體微管與染色體結(jié)合異常、染色體向兩級(jí)移動(dòng)過程滯后、染色體排列錯(cuò)誤和非整倍性等災(zāi)難性后果。人源動(dòng)粒復(fù)合物可分為內(nèi)層動(dòng)粒和外層動(dòng)粒。內(nèi)層動(dòng)粒與組蛋白H3的變體CENP-A結(jié)合,與著絲粒區(qū)域DNA相連。內(nèi)層動(dòng)粒依據(jù)其功能分為五組亞復(fù)合物:CENP-C,CENP-H/I/K/M,CENP-L/N,CENP-T/W/S/X和CENP-O/P/Q/U/R。外層動(dòng)?煞譃镵NL1,MIS12,NDC80三組亞復(fù)合物,在連接微管和激活紡錘體檢查點(diǎn)上發(fā)揮重要作用。近年來動(dòng)粒復(fù)合物的研究獲得較大進(jìn)展,但其結(jié)構(gòu)與組裝方面仍存在許多未知。本文聚焦于內(nèi)層動(dòng)粒重要亞基CENP-C、CENP-H、CENP-K三種蛋白的相互作用分析與結(jié)構(gòu)生物學(xué)嘗試。通過分子克隆與重組表達(dá)系統(tǒng),我們表達(dá)純化了不同長(zhǎng)度的CENP-C和CENP-K蛋白,并重組獲得了CENP-H/K二元復(fù)合物及CENP-C/H/K三元復(fù)合物。通過蛋白質(zhì)復(fù)合物體外重組,我們發(fā)現(xiàn)CENP-H與CENP-K通過二者C端可直接...
【文章來源】:華中科技大學(xué)湖北省211工程院校985工程院校教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:79 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 緒論
1.1 細(xì)胞分裂簡(jiǎn)述
1.2 細(xì)胞分裂相關(guān)的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)
1.3 動(dòng)粒
1.4 CENP-C/H/K蛋白的功能研究
1.5 本文擬解決的問題
2 實(shí)驗(yàn)材料和方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
3.1 CENP-C蛋白質(zhì)PEST-rich結(jié)構(gòu)域的表達(dá)、純化與表征
3.2 CENP-K蛋白質(zhì)及CENP-H/K復(fù)合物的表達(dá)、純化與表征
3.3 CENP-C與 CENP-H/K復(fù)合物的相互作用探索
3.4 CENP-C/H/K復(fù)合物的純化和晶體生長(zhǎng)嘗試
4 小結(jié)和展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄1 在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
附錄2 主要符號(hào)和縮略詞表
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Overexpression of centromere protein H is significantly associated with breast cancer progression and overall patient survival[J]. Wen-Ting Liao1,2,3,Yan Feng1,2,Men-Lin Li1,2,Guang-Lin Liu1,2,Man-Zhi Li1,2,Mu-Sheng Zeng1,2 and Li-Bing Song1,2 1State Key Laboratory of Oncology in South China,Guangzhou,Guangdong 510060,P.R.China;2Department of Experimental Research,Sun Yat-sen University Cancer Center,Guangzhou,Guangdong 510060,P.R.China;3Department of Pathology,School of Basic Medical Sciences,Southern Medical University,Guangdong Provincial Key Laboratory of Molecular Tumor Pathology,Guangzhou,Guangdong 510515,P.R.China.. 癌癥. 2011(09)
本文編號(hào):3629533
【文章來源】:華中科技大學(xué)湖北省211工程院校985工程院校教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:79 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 緒論
1.1 細(xì)胞分裂簡(jiǎn)述
1.2 細(xì)胞分裂相關(guān)的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)
1.3 動(dòng)粒
1.4 CENP-C/H/K蛋白的功能研究
1.5 本文擬解決的問題
2 實(shí)驗(yàn)材料和方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
3.1 CENP-C蛋白質(zhì)PEST-rich結(jié)構(gòu)域的表達(dá)、純化與表征
3.2 CENP-K蛋白質(zhì)及CENP-H/K復(fù)合物的表達(dá)、純化與表征
3.3 CENP-C與 CENP-H/K復(fù)合物的相互作用探索
3.4 CENP-C/H/K復(fù)合物的純化和晶體生長(zhǎng)嘗試
4 小結(jié)和展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄1 在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
附錄2 主要符號(hào)和縮略詞表
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Overexpression of centromere protein H is significantly associated with breast cancer progression and overall patient survival[J]. Wen-Ting Liao1,2,3,Yan Feng1,2,Men-Lin Li1,2,Guang-Lin Liu1,2,Man-Zhi Li1,2,Mu-Sheng Zeng1,2 and Li-Bing Song1,2 1State Key Laboratory of Oncology in South China,Guangzhou,Guangdong 510060,P.R.China;2Department of Experimental Research,Sun Yat-sen University Cancer Center,Guangzhou,Guangdong 510060,P.R.China;3Department of Pathology,School of Basic Medical Sciences,Southern Medical University,Guangdong Provincial Key Laboratory of Molecular Tumor Pathology,Guangzhou,Guangdong 510515,P.R.China.. 癌癥. 2011(09)
本文編號(hào):3629533
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