氣孔作為植物與外界進(jìn)行氣體交換的通道,對植物自身的生長發(fā)育至關(guān)重要。研究表明植物TMM蛋白與植物氣孔的形成發(fā)育密切相關(guān)。本研究利用PCR技術(shù)克隆了小葉楊(Populus simonii Carr.) TMM基因5’端上游的調(diào)控序列pPsTMM,長度為2 336 bp。生物信息學(xué)分析結(jié)果表明:小葉楊啟動(dòng)子pPsTMM除了含有TATA-box、CAAT-box等核心啟動(dòng)子元件之外,還含有多種光響應(yīng)元件、植物激素響應(yīng)元件、抗逆脅迫相關(guān)元件以及生理代謝和生長發(fā)育相關(guān)元件等,說明轉(zhuǎn)錄活性還可能受到光、植物激素、逆境脅迫等因素誘導(dǎo)。利用雙酶切法構(gòu)建植物表達(dá)載體pBI121-pPsTMM-GUS,葉盤法穩(wěn)定遺傳轉(zhuǎn)化煙草,GUS化學(xué)組織染色顯示GUS主要集中在葉芽起始發(fā)育部位表達(dá),說明pPsTMM啟動(dòng)活性具有組織特異性。對非生物脅迫的轉(zhuǎn)基因煙草進(jìn)行GUS化學(xué)染色以及進(jìn)行熒光定量PCR,結(jié)果顯示pPsTMM對不同因素的非生物脅迫響應(yīng)程度存在差異性,干旱和鹽脅迫下啟動(dòng)活性很低,高溫和低溫對其調(diào)控作用也不明顯,但對外在施加的植物激素(GA, NAA, ABA)和水楊酸(SA)響應(yīng)程度很高,說明pPsTMM啟...

【文章來源】： 分子植物育種. 2020,18(01)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：9 頁

【文章目錄】：
1 結(jié)果與分析
    1.1 TMM基因啟動(dòng)子克隆
    1.2 pPsTMM順式作用元件分析
    1.3 pPsTMM表達(dá)模式分析
        1.3.1 pPsTMM組織特異性分析
        1.3.2 非生物脅迫下小葉楊pPsTMM基因啟動(dòng)子表達(dá)模式
2 討論
3 材料與方法
    3.1 試驗(yàn)材料
    3.2 小葉楊基因組DNA提取
    3.3 小葉楊TMM基因啟動(dòng)子克隆
    3.4 生物信息學(xué)分析
    3.5 小葉楊TMM基因啟動(dòng)子植物表達(dá)載體構(gòu)建
    3.6 葉盤法煙草遺傳轉(zhuǎn)化
    3.7 轉(zhuǎn)基因煙草非生物脅迫處理
    3.8 脅迫植株GUS化學(xué)組織染色
    3.9 脅迫植株熒光定量PCR
作者貢獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]WRKY轉(zhuǎn)錄因子在植物逆境應(yīng)答中的功能 [J]. 程遠(yuǎn),姚祝平,阮美穎,李志邈,葉青靜,王榮青,周國治,楊悅儉,萬紅建.  分子植物育種. 2016(11)
[2]木薯可溶性淀粉合成酶(MeSSⅡb)啟動(dòng)子克隆及梯度缺失分析 [J]. 關(guān)志輝,陳新,王海燕,劉陳,馬平安,胡梅珍,王文泉.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2015(08)
[3]荔枝多酚氧化酶基因啟動(dòng)子克隆與功能分析 [J]. 王樹軍,劉保華,孫進(jìn)華,肖茜,李煥苓,王家保.  果樹學(xué)報(bào). 2015(03)
[4]水稻種子特異表達(dá)OsEm基因5'上游調(diào)控區(qū)的克隆與序列分析 [J]. 范晶.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2015(04)
[5]海濱錦葵萌發(fā)期和苗期鹽脅迫反應(yīng)及耐鹽性鑒定指標(biāo)篩選 [J]. 王康,何林池,魏小云,邢建美.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2015(03)
[6]ptr-MIR156a啟動(dòng)子克隆及特征分析 [J]. 陳英,王浩然,許慶,黃敏仁.  南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2011(06)
[7]植物環(huán)境響應(yīng)啟動(dòng)子的誘導(dǎo)元件及轉(zhuǎn)錄因子 [J]. 張毅,尹輝,李丹,朱巍巍,李秋莉.  中國生物工程雜志. 2007(07)



本文編號：3555286