發(fā)布時(shí)間：2021-12-25 03:08

　　目的在小鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)的基礎(chǔ)上,分離淋巴管內(nèi)皮祖細(xì)胞(LEPCs),并引入外源性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-C(VEGF-C)進(jìn)行干預(yù),完善小鼠淋巴內(nèi)皮祖細(xì)胞(LEPCs)體外分離、培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化的實(shí)驗(yàn)方法。方法1、研究以C57BL/6小鼠為對(duì)象,通過改良差時(shí)貼壁法收集48小時(shí)內(nèi)未貼壁的細(xì)胞,并使用EGM-2MV培養(yǎng)基培養(yǎng)至第三代,從而分離純化骨髓細(xì)胞中的內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)。2、使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)第三代細(xì)胞表面標(biāo)記物CD34、CD133、VEGFR-3,并分析VEGFR-3+CD34+細(xì)胞和VEGFR-3+CD133+細(xì)胞在EPCs中所占的百分比。3、通過流式細(xì)胞術(shù)分選出表面標(biāo)記物血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-3(VEGFR-3)陽性的細(xì)胞,并使用免疫熒光化學(xué)法鑒定其表面CD34、CD133的分布及表達(dá)情況。4、將流式細(xì)胞儀分選出的LEPCs培養(yǎng)至第3代,用MTT比色法檢測(cè)LEPCs增殖能力。5、引入外源性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-C(VEGF-C)對(duì)LEPCs進(jìn)行誘導(dǎo)分化,光鏡下觀察LEPCs形態(tài)變化,誘導(dǎo)分化28天后通過免疫熒光化學(xué)法檢測(cè)淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體-1(LYVE-1)表達(dá)情況。...

【文章來源】： 石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
縮略詞說明
前言
材料與方法
    1 材料
    2 方法
    3 統(tǒng)計(jì)處理
    4 技術(shù)路線
結(jié)果
    1 LEPCs的生物學(xué)特性
    2 LEPCs培養(yǎng)與誘導(dǎo)分化
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
石河子大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 導(dǎo)師評(píng)閱表


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3551680