熒光蛋白現(xiàn)在已經(jīng)被廣泛應用于生命科學領域,并且為精度較高的亞細胞級別成像技術提供了便利,而650 nm⁷00 nm范圍的熒光探針在生物體內(nèi)的組織內(nèi),具有透射率更高,成像時間更長,自發(fā)熒光背景弱,光散射率低等優(yōu)勢。而具有大斯托克位移的遠紅熒光蛋白也成為了熒光蛋白領域內(nèi)的研究熱點。藻膽蛋白作為藻膽體的重要組成部分,可以捕獲橙光、紅光和遠紅光來用于藍藻和紅藻的光合作用,而藻膽體核心的藻膽蛋白如別藻藍蛋白則可以吸收遠紅光,從而將能量傳遞到反應中心。因此別藻藍蛋白的亞基可以被設計成一些遠紅熒光蛋白,例如嗜熱藻Chroococcidiopsis thermalis PCC7203的中藻膽體核亞基ApcF2優(yōu)化發(fā)展而來的可以結合BV色素的遠紅熒光蛋白BDFP1.2/1.6等系列。但是目前的熒光蛋白的斯托克位移都比較小,這極大地限制了在細胞內(nèi)多色成像的應用。mCherry是一個被廣泛應用的優(yōu)良的紅色熒光蛋白,因為其有著較高的熒光量子產(chǎn)率而可以作為FRET中的能量供體,從而將能量有效地傳遞給能量受體例如BDFP1.6等遠紅熒光蛋白。我們將mCherry與BDFP1.6熒光蛋白通過不... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：118 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

藻膽體與其關聯(lián)的光合系統(tǒng)PSI結構示意圖

圖 1.3 依賴鐵氧蛋白還原酶的藻膽色素的生物合成[8]。Figure 1.3 Bilin biosynthesis by ferredoxin-dependent bilin reductases[8].脫輔基蛋白通過基因轉錄和翻譯合成以后，膽色素與脫輔基蛋白的保酸形成硫醚鍵，形成藻膽蛋白，從而使得藻膽體參與到捕獲光能的過細菌的光合作用順利完成。熒光蛋白的研究進展光蛋白作為現(xiàn)代生物學領域內(nèi)的一種分子標記物，已經(jīng)被廣泛應用到內(nèi)，成為了科學家開展科研活動必不可缺的工具。同時也吸引得越來們對熒光蛋白產(chǎn)生興趣。 GFP 綠色熒光蛋白家族色熒光蛋白 GFP（Green Fluorescent Protein）是一類應用廣泛的熒光蛋

6圖 1.4 利用 GFP 的衍生物進行來 Ca2+濃度檢測[42]。gure 1.4 Scheme showing how FRET between GFPs can measure Ca2+02 年，Takeharu Nagai 等人在 EYFP 的基礎上進行隨機突變，4L的突變體命名為Venus，極大的提升了在37 ℃條件下蛋白成4L/M153T/V163A/S175G 的突變體 Y-Venus，則有著較高的耐


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