為了明確活性藍4（RB-4）的親和作用,通過紫外吸收光譜、熒光光譜以及分子對接方法,研究了RB-4與牛血清白蛋白（BSA）之間相互作用的分子機制。研究結(jié)果表明:RB-4與BSA的相互作用使BSA內(nèi)部疏水性基團暴露。RB-4與BSA通過靜態(tài)淬滅機制反應(yīng),結(jié)合位點數(shù)約為2。結(jié)合過程的熱力學(xué)參數(shù)△G<0,且△H>0,△S>0,表明結(jié)合過程是自發(fā)放熱過程且主要作用力為疏水作用力。RB-4與BSA之間的結(jié)合導(dǎo)致BSA的三級結(jié)構(gòu)被破壞,從而使酪氨酸殘基和色氨酸殘基周圍微環(huán)境的疏水性增強。BSA與RB-4之間的主要氨基酸作用位點為Phe-567、Ala-568、Ala-510、Val-575、Pro-572、Phe-508和Phe-506,同時還存在一定的靜電作用和氫鍵作用。 

【文章來源】：河南科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2020,41(06)北大核心

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

RB-4與BSA相互作用的同步熒光光譜

三維熒光光譜能準(zhǔn)確、可靠地檢驗蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和微環(huán)境變化。圖4為RB-4與BSA相互作用的三維熒光光譜。由圖4可知:在兩個體系中存在特征為△λem=△λex的瑞利散射,即圖4中所示的“山脊”峰(峰A)[22]。另外,對于BSA(見圖4a),在△λem=345 nm處存在峰B,這是由BSA中氨基酸的π-π*躍遷所造成的。而對于RB-4與BSA結(jié)合的反應(yīng)體系(見圖4b),峰B的熒光強度顯著降低,且λem發(fā)生輕微藍移(λem=343 nm),表明在酪氨酸殘基和色氨酸殘基周圍微環(huán)境中的疏水性增強,這與同步熒光光譜的結(jié)果一致。2.7 分子對接

圖5為RB-4與BSA的分子對接模型。圖5a顯示了RB-4與BSA分子對接的整體結(jié)果,在此構(gòu)象下,結(jié)合自由能最低。RB-4與BSA對接時,周邊存在11個氨基酸殘基,包括離子型氨基酸殘基:Glu-564和His-509;疏水型殘基:Phe-567、Ala-568、Ala-510、Val-575、Pro-572、Phe-508和Phe-506;親水型殘基:Gly-571和Thr-507。其中,Phe-508、Ala-510、Glu-564與RB-4形成5個氫鍵(見圖5b)。分子對接結(jié)果表明:BSA與RB-4之間的主要作用力為疏水作用,同時還存在一定的靜電作用與氫鍵作用,該結(jié)果與光譜試驗結(jié)果一致。3 結(jié)論

【參考文獻】：
期刊論文
[1]光譜法和分子對接研究紅斑紅曲胺與牛血清白蛋白相互作用[J]. 黃朝波,徐晗,楊明冠,李貞景,楊華,王昌祿,周慶禮.  光譜學(xué)與光譜分析. 2019(10)
[2]光譜法結(jié)合分子動力學(xué)模擬研究臭氧對肌紅蛋白結(jié)構(gòu)的作用機制[J]. 呂飛,張靜,陳鑫璐,劉建華,丁玉庭.  光譜學(xué)與光譜分析. 2019(10)
[3]表沒食子兒茶素沒食子酸酯和米糠蛋白的相互作用[J]. 苗向碩,吳偉,吳曉娟.  中國糧油學(xué)報. 2019(12)
[4]熒光光譜法和分子對接模擬技術(shù)研究白藜蘆醇與胃蛋白酶的相互作用[J]. 任國艷,孫賀,樊金玲,牛曉莉,郭金英,吳影,崔國庭.  光譜學(xué)與光譜分析. 2019(04)
[5]汽巴藍F3GA染料親和色譜介質(zhì)的制備及其對黑蕓豆凝集素的特異性吸附[J]. 趙金龍,李延紅,孫漢巨,方利,孫先保,唐明明,張揚,武香玉,何述棟.  食品科學(xué). 2018(23)
[6]光譜法研究卡比多巴與牛血清蛋白相互作用[J]. 韓永光,梁保林,壽先苗,李曉飛.  國際藥學(xué)研究雜志. 2018(06)
[7]光譜法和分子對接方法研究羅利環(huán)素與人血清白蛋白的相互作用（英文）[J]. 方慶,董澄宇,王宇,劉穎.  光譜學(xué)與光譜分析. 2018(03)
[8]蛋白A介質(zhì)抗體吸附性能及耐堿性的量熱學(xué)[J]. 盛志,史清洪,白姝.  化學(xué)工業(yè)與工程. 2017(04)
[9]La3+和Dy3+殼聚糖配合物與牛血清白蛋白相互作用[J]. 吳錦繡,李梅,柳召剛,胡艷宏,王覓堂.  過程工程學(xué)報. 2016(02)
[10]熒光光譜法研究橙皮苷與牛血清白蛋白相互作用特征[J]. 張國文,王安萍,蔣婷,闕青民.  分析試驗室. 2008(01)



本文編號：3477696