從維氏氣單胞菌C4（A.veronii C4）基因組DNA中擴(kuò)增得到acrR基因上游同源臂片段和下游同源臂片段,連接到自殺質(zhì)粒pRE112中以構(gòu)建敲除重組質(zhì)粒pRE112-ΔacrR,并通過電轉(zhuǎn)化將敲除重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌WM3064中,再通過雙親接合將其轉(zhuǎn)入維氏氣單胞菌C4中,以篩選得到acrR基因敲除的維氏氣單胞菌突變株。生長曲線測定結(jié)果顯示acrR基因敲除不會(huì)影響維氏氣單胞菌的生長。生物膜測定表明,敲除acrR基因的維氏氣單胞菌株表現(xiàn)出生物膜的形成顯著增加。所構(gòu)建的敲除株為進(jìn)一步探索AcrR在維氏氣單胞菌中的功能提供了必要材料,并提示AcrR在細(xì)菌生物膜形成中的潛在調(diào)控功能。 

【文章來源】：生物學(xué)雜志. 2020,37(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 質(zhì)粒、菌株及引物
        1.1.2 試劑盒、酶及藥品
    1.2 方法
        1.2.1 acrR基因上、下游同源序列擴(kuò)增
        1.2.2 pRE112-ΔacrR載體構(gòu)建
        1.2.3 雙親接合及acrR基因敲除菌株的篩選
        1.2.4 生長曲線測定
        1.2.5 生物膜測定
2 結(jié)果與分析
    2.1 pRE112-ΔacrR載體的構(gòu)建
    2.2 雙親接合及ΔacrR菌株的篩選
    2.3 ΔacrR敲除對(duì)生長的影響
    2.4 ΔacrR敲除對(duì)生物膜形成的影響
3 結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]腸桿菌科細(xì)菌外排泵AcrAB-TolC調(diào)控機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 程玉謙,祁偉.  山東醫(yī)藥. 2015(21)
[2]維氏氣單胞菌研究進(jìn)展[J]. 吳同壘,單曉楓,孟慶峰,郭偉生,王偉利,錢愛東.  中國獸藥雜志. 2011(07)
[3]魚源維氏氣單胞菌的生物特性和基因分型[J]. 汪開毓,范方玲,肖丹,牟巧鳳,黃錦爐.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2011(04)



本文編號(hào)：3473799