木薯是全世界尤其是熱帶地區(qū)十分重要的糧食作物,植物中鈣調(diào)蛋白轉(zhuǎn)錄因子（calmodulin-binding transcription activator, CAMTA）參與植物生長發(fā)育調(diào)控。為更好地了解CAMTA基因結(jié)構(gòu)和特征,探究木薯鈣調(diào)蛋白轉(zhuǎn)錄因子在抗病免疫反應(yīng)中的功能。本研究從木薯中克隆得到一個MeCAMTA基因,并構(gòu)建pET32a-MeCAMTA原核表達(dá)載體,分析不同溫度對原核表達(dá)菌株生長情況的影響,探究不同溫度條件下CAMTA蛋白誘導(dǎo)表達(dá)情況,并對MeCAMTA啟動子元件進(jìn)行分析。結(jié)果顯示,溫度對原核表達(dá)菌株生長情況有一定影響,在28℃的誘導(dǎo)條件下可在原核表達(dá)pET32a-MeCAMTA菌株上清中獲得CAMTA蛋白,MeCAMTA啟動子元件分析結(jié)果表明該基因啟動子中含有多個參與脅迫反應(yīng)的順式作用元件。探究木薯免疫調(diào)控相關(guān)基因CAMTA的功能,有助于完善木薯抗病免疫反應(yīng)中相關(guān)的信號通路,有助于提高木薯抗病性。 

【文章來源】：分子植物育種. 2020,18(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 結(jié)果與分析
    1.1 MeCAMTA基因的克隆
    1.2 原核表達(dá)載體的構(gòu)建
    1.3 不同溫度對原核表達(dá)MeCAMTA菌株的生長影響
    1.4 MeCAMTA重組蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)
    1.5 MeCAMTA重組蛋白的純化和Western Blot驗證
    1.6 MeCAMTA啟動子元件預(yù)測
2 討論
3 材料與方法
    3.1 試驗材料
    3.2 木薯總RNA的提取及cDNA的合成
    3.3 MeCAMTA基因的克隆
    3.4 原核表達(dá)載體的構(gòu)建
    3.5 不同溫度對原核表達(dá)MeCAMTA菌株的生長影響
    3.6 SDS-PAGE電泳檢測
    3.7 MeCAMTA重組蛋白的純化
    3.8 MeCAMTA重組蛋白的Western Blot驗證
    3.9 MeCAMTA啟動子元件預(yù)測
作者貢獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人參Cu/Zn SOD原核可溶性表達(dá)條件的優(yōu)化[J]. 高云鵬,趙雨,王思明,劉美辰,王佳雯.  長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報. 2018(04)

碩士論文
[1]鯽魚MBSP重組表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)化及其穩(wěn)定性機(jī)制研究[D]. 李婷.集美大學(xué) 2016



本文編號：3430097