發(fā)布時間：2021-10-08 13:40

　　目的:構建破骨細胞特異性Trio基因敲除小鼠模型,探究Trio在骨改建過程中對破骨細胞的影響。方法:應用creloxp系統(tǒng)培育破骨細胞特異性Trio基因敲除小鼠,Micro-CT掃描小鼠股骨,股骨組織切片采用HE染色、抗酒石酸酸性磷酸酶染色觀察成骨細胞及破骨細胞數(shù)量。使用核因子（nuclear factor,NF）-κB受體活化因子配體及巨噬細胞集落刺激因子誘導小鼠骨髓細胞分化為破骨細胞,觀測Trio對破骨細胞形成的影響。結果:Trio基因敲除小鼠的體型小,Micro-CT顯示骨密度及相關參數(shù)升高。組織學染色表明基因敲除小鼠股骨的骨量增加,破骨細胞變少。體外實驗中,Trio基因敲除小鼠骨髓細胞誘導分化的破骨細胞數(shù)量減少。結論:成功構建破骨細胞特異性Trio基因敲除小鼠模型,Trio敲除后,小鼠骨量增加,破骨細胞的分化受到抑制。 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學學報(自然科學版). 2020,40(09)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 CKO小鼠的繁育
        1.2.2 基因型鑒定
        1.2.3 樣本收集
        1.2.4 Micro-CT
        1.2.5 破骨細胞的提取及培養(yǎng)
        1.2.6 免疫熒光染色
        1.2.7 RNA提取及實時熒光定量PCR(quantitativereal-time PCR,RT-qPCR)
        1.2.8 蛋白提取及Western blot
        1.2.9 HE染色
        1.2.1 0 抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase,TRAP）染色
    1.3 統(tǒng)計學方法
2 結果
    2.1 Trio在破骨細胞中表達且集中于細胞邊緣
    2.2 Trio基因特異性敲除小鼠模型的鑒定
    2.3 CKO小鼠體型減小并表現(xiàn)出骨量增加
    2.4 體外培養(yǎng)的CKO小鼠破骨細胞數(shù)量減少
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Distinct functions of Trio GEF domains in axon outgrowth of cerebellar granule neurons[J]. Tao Tao,Jie Sun,Yajing Peng,Pei Wang,Xin Chen,Wei Zhao,Yeqiong Li,Lisha Wei,Wei Wang,Yanyan Zheng,Ye Wang,Xuena Zhang,Min-Sheng Zhu.  Journal of Genetics and Genomics. 2019(02)
[2]正畸驅動的骨皮質切開術對巨噬細胞的作用及機制研究[J]. 王燕,朱琳琳,王思雨,張舒婷,孫雯,李琥,張瀚文,嚴斌.  南京醫(yī)科大學學報(自然科學版). 2018(05)
[3]正畸牙齒移動中破骨細胞活動的影響因素[J]. 米雁翎,劉婷,蔣自然,張凡.  口腔醫(yī)學. 2017(01)



本文編號：3424274