單核增生李斯特菌（Listeria monocytogenes,Lm）是一種非常典型的兼性胞內(nèi)革蘭氏陽性的食源性致病菌,是李斯特菌病的病原體。李斯特菌病的臨床表現(xiàn)多樣,這與Lm在人體內(nèi)能夠跨越三個緊密屏障的能力有關(guān)。食用受污染的食物后,Lm可越過腸屏障,侵入腸上皮,導(dǎo)致腸胃炎。此外,Lm還具有跨越孕婦胎盤屏障的獨特能力,導(dǎo)致胎兒感染和敗血性流產(chǎn)。最后,Lm能夠穿過血腦屏障,感染腦膜,導(dǎo)致致命的腦膜炎和腦炎。在先天免疫細胞中,巨噬細胞在識別和清除病原體中發(fā)揮著重要作用。Kupffer細胞（KCs）是肝臟中的定居巨噬細胞,占機體所有組織巨噬細胞的80-90%。在正常生理情況下,肝臟中的巨噬細胞絕大部分都是KCs。但在李斯特菌感染過程中,肝臟中有兩種主要的巨噬細胞亞群,分別是KCs和單核細胞來源的巨噬細胞。KCs是起源于胚胎時期的巨噬細胞,排列在肝竇周圍,被認為是宿主抗腸道入侵細菌的關(guān)鍵因素。但是現(xiàn)有的研究結(jié)果顯示Lm感染宿主后,KCs快速壞死,同時招募大量的單核細胞來源巨噬細胞并遷移至肝臟,從而快速控制感染,清除細菌。由于感染早期,KCs即大量死亡,暗示單核巨噬細胞在抗李斯特菌過程中發(fā)揮著... 

【文章來源】：軍事科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

稀釋涂布法梯度稀釋不同倍數(shù)及菌落生長情況示意圖

軍事科學(xué)院碩士學(xué)位論文第11頁圖2不同感染劑量下C57小鼠的生存率每組小鼠分別尾靜脈注射不同劑量的Lm，觀察其生存率情況。Inf.dpi：尾靜脈感染后天數(shù)。

軍事科學(xué)院碩士學(xué)位論文第15頁B圖3不同感染劑量下C57小鼠肝臟HE染色情況每組小鼠分別感染不同劑量的Lm。圖A中從左往右依次是：1×105、5×105、1×106CFU的感染劑量。在感染后第3天取小鼠肝臟做HE染色。圖B為不同感染劑量與肝臟中出現(xiàn)的炎性灶的統(tǒng)計圖。使用的統(tǒng)計學(xué)軟件為GraphPadPrism7，統(tǒng)計學(xué)方法one-wayANOVA，**P<0.05，****P<0.0001。每組小鼠n=3。2.2小鼠感染單核增生李斯特菌的劑量越大炎性細胞浸潤越多接下來，我們通過流式細胞術(shù)分析感染了不同劑量單核增生李斯特菌的小鼠肝臟中炎性細胞的數(shù)量變化，每組小鼠n=3。流式圈門策略見圖4A，首先通過FSC/SSC散點圖去除細胞碎片，圈出細胞（一級門），然后在FSC-W/FSC-H和SSC-W/SSC-H散點圖中去除粘連細胞（二級門），圈出單細胞，接著在CD45/SSC-A散點圖中圈出CD45陽性的細胞（三級門），接下來用Ly6C/SSC-A中圈出Ly6Clow的細胞（四級門）；最后用F4/80/CD11b圈出F4/80+CD11b+和F4/80lowCD11b+細胞群（五級門），見圖4B。最終圈門結(jié)果展示在圖4B中，可以看出隨著感染單核增生李斯特菌劑量的增加，肝臟KCs的細胞數(shù)量依次減少，而F4/80lowCD11b+所代表的的炎性細胞群的數(shù)量則在增加。這說明感染后，感染程度隨感染劑量增加，炎癥反應(yīng)也越強。


本文編號：3317463