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洋蔥orf393基因線粒體定位表達載體構建及功能初探

發(fā)布時間:2021-06-18 16:18
  通過轉基因擬南芥表型分析對洋蔥線粒體差異表達基因orf393的功能進行了初步研究。通過In-Fusion Cloning的方法,將基因orf393與編碼線粒體定位的靶向肽序列Rf1b5’融合,構建了orf393基因的線粒體定位表達載體pROK2-Rf1b5’-orf393,通過花序浸染法成功轉化至野生型擬南芥,獲得了雄性育性降低的擬南芥轉基因植株,轉基因植株的雄蕊花絲變短,柱頭表面光滑幾乎沒有花粉附著,花藥顏色暗淡無法正常開裂,種莢短小皺縮、結實率低。亞歷山大染色實驗結果顯示,轉基因植株的花藥中花粉量少,僅含有極少量的活性花粉。初步證明線粒體基因orf393與細胞質雄性不育有一定關系,為明確orf393參與洋蔥細胞質雄性不育的分子機制提供了參考。 

【文章來源】:分子植物育種. 2020,18(18)北大核心CSCD

【文章頁數】:7 頁

【部分圖文】:

洋蔥orf393基因線粒體定位表達載體構建及功能初探


重組質粒pROK2-Rf1b-orf393菌落PCR

表達載體,壓力試驗,卡那霉素,菌落


表達載體pROK2-Rf1b5"-orf393的酶切驗證

壓力試驗,卡那霉素,轉基因植株,抗性


卡那霉素篩選壓力試驗

【參考文獻】:
期刊論文
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本文編號:3236984

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